Пиктограмма сайт: Attention Required! | Cloudflare

Я загрузил favicon. ico в корневой каталог моего клиента (htdocs) на сервере и добавил следующее перед тегом </head> : <link type=image/x-icon rel=icon href=/favicon.ico/> <link…

Я посетил эти вопросы, и ни один из ответов не сработал для меня: Почему doesn’t мой любимый значок больше не работает в Chrome? Chrome doesn’t показать favicon Мой Код Мой сайт…

Google Chrome не может показать значок фаворита веб-сайта http: / / www.hausnaturpur.de / В то время как Firefox и другие браузеры поддерживают значок fav. Это используемый код: <link…

Я пытаюсь заставить значок моего сайта появиться в Google Chrome, но не понимаю, почему это не так. Он работает в IE, FF, Opera и Safari. Вот код, связанный со значком, который в настоящее время…

Привет я настроил любимый значок на моем сайте и когда я пытаюсь сделать ярлык на рабочем столе для веб сайта он создает значок на ярлыке который выглядит следующим образом: Но мне нужно, чтобы это…

У нас есть веб-приложение, которое имеет значок домашнего экрана, определенный следующим образом: <link rel=apple-touch-icon-precomposed href=http://example.com/icon.png> До сих пор это…

Я хочу создать значок запуска Android для веб-сайта , но в Windows на основе chrome URL появляется значок, который отсутствует в Android Chrome ‘Add to HomeScreen’.For timgoolfiger.com этот значок…

Я пытаюсь изменить значок с моего сайта , там уже есть другой значок, но он, похоже, не меняется. Я также не могу найти, где этот значок инициализируется в первую очередь. это то, что я добавил на…

Для браузера Chrome на Android <link rel=icon sizes=180×180 href=apple-touch-icon.png> а также для Safari на устройствах Apple <link rel=apple-touch-icon href=apple-touch-icon.png> есть…

Я создаю веб-приложение, и когда я add to Home Screen на своем устройстве android, значок моего приложения отображается неправильно. Ниже приведен его скриншот, а ниже-то, как на самом деле должен…

Программное обеспечение для спутникового GPS GNSS оборудования

Дорогие коллеги, мы уведомляем Вас, что с 16 мая 2017 года компания НАВГЕОКОМ переименована в Hexagon. Компания Hexagon является лидером на рынке информационных технологий, предлагая уникальное портфолио для геопространственных и промышленных решений, которое помогает специалистам во многих отраслях качественно выполнять свою работу.

Компания Hexagon предоставляет следующие решения:

• Электронные тахеометры
• GNSS-технологии
• Роботизированные и сканирующие тахеометры
• Электронные тахеометры и GNSS-приёмники, произведенные в России
• Автоматизация дорожно-строительной техники
• Наземное, мобильное и воздушное лазерное сканирование
• Высокоточные оптические и цифровые нивелиры
• Лазерные дальномеры Leica Disto TM
• Системы поиска и трассировки коммуникаций
• Ротационные лазерные нивелиры
• Референцные ГЛОНАСС/GPS станции
• Мониторинг деформаций
• Интерферометрические радары для мониторинга стабильности уступов
• Геоинформационные технологии
• Беспилотные летательные системы
• Цифровая аэрофотосъемка
• Аэробатиметрия

Сайты показывают вращающуюся пиктограмму и никогда не заканчивают загрузку

Эта статья объясняет, что делать, когда определенные (не все) веб-сайты начинают загрузку, но никогда её не заканчивают (то есть вкладка отображает вращающуюся пиктограмму и «Соединение. ..» в течение нескольких минут).

Если ни одно из нижеуказанных решений не работает, попробуйте методы, описанные в статье Диагностика и решение проблем в Firefox, чтобы проверить, не помогут ли они решить ваши проблемы.

Известно, что разновидность трояна Vundo вызывает у Firefox проблему загрузки определенных сайтов с высоким трафиком, в том числе Google, Yahoo, MySpace, Фейсбук и многие другие. Не все варианты трояна Vundo могут быть обнаружены или удалены сканерами вредоносных программ.

Однако, в первую очередь вам следует проверить компьютер на наличие заражений. Для получения подробных инструкций прочтите статью Устранение проблем Firefox, вызванных вредоносными программами.

На медленных подключениях, слишком большое число соединений HTTP может стать причиной тайм-аутов.

1. Введите about:config в адресной строке и нажмите EnterReturn.
   Может появиться страница с предупреждением. Щёлкните по Я принимаю на себя риск!Принять риск и продолжить, чтобы перейти на страницу about:config.
2. В поле Фильтр вверху наберите network.http.max-connections.
3. Дважды щёлкните на настройке network.http.max-connections. Откроется диалоговое окно «Введите значение (целое)».
4. В поле наберите 30, которое было значением по умолчанию в старых версиях Firefox, и нажмите OK.

В редких случаях, веб-страница может использовать внешний файл JavaScript, который имеет неправильный формат. Попробуйте отключить JavaScript — смотри Параметры и настройки JavaScript для интерактивных веб-страниц. Если страница теперь завершила загрузку, то некорректный файл Javascript может приходить от:

• Прокси-фильтра, который некорректно фильтрует файлы веб-сайта. Если вы работаете с прокси-фильтром, таким как Privoxy, попробуйте его отключить.
• Сервера. Свяжитесь с администратором сайта по поводу этого веб-сайта.

пиктограмм — скачать бесплатно, PNG и SVG

Иконки

Фото

Музыка

Иллюстрации

Усталый человек

+ Коллекция

Усталый человек

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

+ Коллекция

+ Коллекция

+ Коллекция

+ Коллекция

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

Колонки

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

Столбцы

+ Коллекция

+ Коллекция

+ Коллекция

Язык жестов

+ Коллекция

Язык жестов

+ Коллекция

Язык жестов

+ Коллекция

Язык жестов

+ Коллекция

Язык жестов

+ Коллекция

+ Коллекция

+ Коллекция

Язык жестов

+ Коллекция

Язык жестов

+ Коллекция

Язык жестов

+ Коллекция

Язык жестов

+ Коллекция

Язык жестов

+ Коллекция

000 Язык жестов + Коллекция

Язык жестов

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Коллекция

Газовая промышленность +

г as Industry

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Газовая промышленность

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Сбор

000 Газовая промышленность + Коллекция

Газовая промышленность

+ Коллекция

Газовая промышленность

+ Коллекция

Термоусадочная

+ Коллекция

Термоусадочная

+ Коллекция

Термоусадочная

+ Коллекция

000 Термоусадочная

+ Коллекция 9000 3

Пиктограммы опасностей GHS для бесплатной загрузки

В системе GHS используются 9 пиктограмм опасности GHS с их номерами GHS, сигнальными словами и значениями, указанными в таблице ниже. Эти пиктограммы также можно найти на сайте ЕЭК ООН. Однако пиктограммы опасности доступны на сайте ЕЭК ООН в прозрачной форме только в формате eps. Они прозрачны не только за пределами красной границы, но и внутри нее, ! Наши пиктограммы в формате PGN прозрачны только вне его. Поэтому белые части пиктограммы внутри красной рамки остаются белыми на цветном фоне. Прозрачность за красной рамкой необходима для размещения пиктограмм между рамками, как показано в конце этой страницы.

Вы также можете скачать этикетки для транспортной маркировки того же формата и с тем же разрешением.

Чтобы загрузить пиктограммы в формате PGN с хорошим разрешением (3000 пикселей в ширину / высоту), щелкните правой кнопкой мыши нужную пиктограмму и выберите «Безопасная цель как …» (или «Сохранить ссылку как …»).
Щелкнув правой кнопкой мыши по тексту каждой пиктограммы и выбрав «Безопасная цель как …» (или «Сохранить ссылку как …»), вы можете получить ее также в форме 45 ° (в виде квадрата в TIF -формат, 2100×2100 пикселей).Они подходят для печати этикеток.

Наименование пиктограмм:

GHS01: Взрывающаяся бомба
GHS02: Пламя
GHS03: Пламя над кругом
GHS04: Газовый баллон
GHS05: Коррозия
GHS06: Череп и скрещенные кости
GHS07: Восклицательный знак
GHS08: Опасность для здоровья
GHS09: Окружающая среда

Пиктограмма GHS08 для « Системные опасности для здоровья » указывает на несколько серьезных опасностей для внутренних органов, например.г .:
Респираторная сенсибилизация
,00 Опасность при аспирации
Канцерогенность, мутагенность зародышевых клеток или репродуктивная токсичность (CMR)
Специфическая избирательная токсичность, поражающая отдельные органы-мишени
,00 Эти опасности обозначаются используемыми H-фразами.

Сигнальные слова, обозначающие степень опасности

Относительная степень опасности, обозначенная пиктограммой, обозначается сигнальными словами:
Опасность используется для более высокого уровня.
Предупреждение используется для нижнего уровня.
Сигнальные слова доступны на 22 языках.

в меню навигации

Формулировки опасности (H-фразы) и меры предосторожности (P-фразы)

Помимо пиктограмм и сигнальных слов, система ghs использует H-фразы и P-фразы.
H-фразы используются для более точного описания опасного свойства, например:
Острая токсичность, категории опасности 1 и 2: h400 Смертельно при проглатывании.
Острая токсичность, категория опасности 3: h401 Токсично при проглатывании.
Острая токсичность, категория опасности 4: h402 Вредно при проглатывании.

Фразы P используются для обозначения важных мер безопасности при обращении с продуктом, например:
P102 Хранить в недоступном для детей месте.
P240 Заземлить / связать контейнер и приемное оборудование.
P361 Немедленно снять / снять всю загрязненную одежду.

Загрузите H-фразы и P-фразы:

[H + P фразы 8-е ATP / PDF]; [H + P фразы 12 ATP / PDF]; [H + P фразы 8-й ATP / DOCX]; [H + P-фразы, 12-е ATP / DOCX]
H-фразы и P-фразы в соответствии с 8-м ATP являются официальными фразами с февраля 2018 года.Те, которые согласно 12-му СПС будут подавать с 17 октября 2020 года, они уже могут быть поданы заранее. Химические продукты, которые неправильно маркированы в соответствии с 8-м СПС, но были упакованы и маркированы в соответствии с 4-м СПС до 1 февраля 2018 г., могут быть размещены на рынке до 1 февраля 2020 г.
Если вам нужны эти фразы на немецком, французском, итальянском или испанском языках, см. Стр. H- и P-Sätze.
Вы можете найти его на других языках в приложениях III и IV к последнему сводному регламенту CLP (см. Страницу [Загрузки]).
Очень хороший источник фраз H и P на 35 языках — это сайт http://schoolscout24.de/cgi-bin/keminaco/hppinput.cgi.

Связь между классами / категориями опасности и различными пиктограммами, сигнальными словами, H-фразами и P-фразами

В следующих таблицах Класс опасности + фразы категории H-8-й СПС и класс опасности + фразы категории-H-16-й СПС показывают, какие пиктограммы, сигнальные слова, классы / категории опасности, номера классов опасности, коды опасности и H-фразы относятся друг к другу согласно 8-му и 16-й АТФ соответственно.
В таблицах Коды опасностей, H-фразы, P-фразы — 8-й СПС и коды опасностей, H-фразы, P-фразы-16-е ATP показывают, какие пиктограммы, сигнальные слова, коды опасности, H-фразы и P-фразы относятся друг к другу согласно 8-му и 12-му СПС. АТФ соответственно.

Маленькие пиктограммы для текстовых иллюстраций или презентаций в PowerPoint, для дизайна этикеток и т. Д.

Эти пиктограммы опасности в формате tif с диагональю 2 см и разрешением 300 dpi прозрачны за пределами красной границы.Их можно расположить по рамке, как показано ниже. Чтобы загрузить их, щелкните его правой кнопкой мыши и выберите «Безопасная цель как …».

Подсказка: Для точного позиционирования пиктограммы в Powerpoint отметьте ее, нажмите клавишу управления и переместите пиктограмму с помощью клавиш направления пиксель за пикселем в желаемое положение. Таким образом можно получить любую комбинацию компактно расположенных пиктограмм. С помощью экрана с высоким разрешением и инструментария Windows 7 или 10 вы можете создать его изображение.

Минимальный размер пиктограмм в соответствии с европейским регламентом CLP

Размер пиктограмм GS определяется поверхностью, ограниченной красной рамкой (включая границу).
Минимальный размер пиктограмм определяется не разделом 1.2.1 приложения I первоначального регламента CLP, а его адаптацией к техническому прогрессу в соответствии с регламентом (ЕС) № 286/2011 [PDF, 2,4 МБ].
Для упаковок различных размеров предписаны следующие минимальные размеры отдельных пиктограмм (край x край красного квадрата):
для упаковки до 3 литров: не менее 10х10 мм, по возможности 16х16 мм,
для упаковки объемом от 3 до 50 литров: минимум 23×23 мм,
для размеров упаковки от 50 до 500 литров: минимум 32×32 мм,
для размеров упаковки> 500 литров: не менее 46×46 мм.

В Швейцарии минимальный размер отличается для упаковки объемом до 3 литров:
для упаковки объемом до 0,125 литра: не менее 10х10 мм,
для упаковок размером от 0,125 до 3 литров: не менее 16×16 мм.

Минимальный размер этикеток в соответствии с европейским регламентом CLP

Минимальный размер этикеток также определяется в соответствии с разделом 1.2.1 приложения I Регламента (ЕС) Nr. 286/2011, упомянутые выше, в зависимости от размера упаковки:
для упаковки до 3 литров: не менее 52×74 мм,
для размеров упаковки от 3 до 50 литров: минимум 74×105 мм,
для размеров упаковки от 50 до 500 литров: минимум 105×148 мм,
для размеров упаковки> 500 литров: не менее 148×210 мм.

Указанная выше поверхность этикетки должна использоваться для информации, требуемой Статьей 17 Регламента CLP на на одном языке , а именно:
Наименование, адрес, телефон поставщика,
Идентификаторы товаров,
В случае продуктов для широкой публики также номинальное количество заполнения (если не указано где-либо еще на упаковке),
Пиктограммы опасности и сигнальные слова по мере необходимости,
H-фразы и P-фразы по мере необходимости,
Где применимо, дополнительная информация в соответствии со статьей 25 регламента CLP [20 МБ].

Минимальный размер текста

Рекомендуемый минимальный размер текста на этикетке составляет около 1,8 мм (как у Arial 7).

Расположение на этикетке

Этикетка может быть больше, чем указано выше, например для размещения информации также на втором языке и / или для включения дополнительной информации по безопасности и т. д. без необходимости увеличения размера пиктограмм.
Пиктограммы опасности элементов, сигнальное слово, H-фразы и P-фразы всегда должны размещаться на этикетке вместе.
В случае многоязычных этикеток, предписанных лингвистических элементов маркировки должны быть размещены вместе по языку.

в меню навигации

пиктограмм GHS | ЕЭК ООН

Согласованная на глобальном уровне система классификации и маркировки химических веществ (СГС)

На этой веб-странице отображается:

• пиктограммы GHS, применимые к секторам, кроме перевозки опасных грузов (т.е. пиктограммы с красной рамкой)
• пиктограммы для перевозки опасных грузов (обычно называемые «этикетками» в правилах перевозки опасных грузов), применимые к транспортным классам, для которых существует эквивалентный класс опасности GHS.

Для элементов сообщения об опасности (ярлыков и знаков), применимых к другим классам перевозки или условий перевозки, подпадающих под действие правил перевозки опасных грузов, но не упомянутых в СГС (например, ярлыки для классов 7 и 9; маркировка вещества для повышенных температур; маркировка литиевой батареи; и т. д.) см. Часть 5 Рекомендаций Организации Объединенных Наций по перевозке опасных грузов, Типовые правила.

Дополнительную информацию о распределении элементов маркировки СГС см. В Приложении 1 к СГС.Чтобы ознакомиться с официальным текстом СГС, перейдите в раздел «Правовые инструменты и рекомендации-> СГС-> Официальный текст и исправления СГС» в левом меню.

Чтобы загрузить пиктограммы, щелкните правой кнопкой мыши форматы под каждым изображением и выберите Сохранить объект как …

Примечания:
Файлы GIF имеют формат RGB .
Для цветов CMYK используйте файл «label» (формат «label» — это файл TIF с изображением, повернутым на 45 °, для прямой печати этикеток).
Пиктограммы доступны только в форматах, указанных ниже.

* : Для класса взрывчатых веществ (т. Е. Класса 1 для транспорта) « * » следует заменить указанием группы совместимости или оставить пустым, если взрывчатое вещество является дополнительной опасностью. Для получения дополнительной информации см. Главу 5.2 Рекомендаций Организации Объединенных Наций по перевозке опасных грузов, Типовые правила .

** : Символ, номер и граница могут отображаться черным цветом вместо белого .

*** : символ, число и граница могут отображаться белым, а не черным цветом.

Петроглифов и пиктограмм — Национальный памятник динозавров (Служба национальных парков США)

Fremont включает как петроглифы (узоры, вырезанные или вырезанные в скале), так и пиктограммы (узоры, нарисованные на скале). Пиктограммы здесь относительно редки, возможно, потому, что они легче поддаются выветриванию. На некоторых петроглифах видны следы пигмента, что, возможно, указывает на то, что многие рисунки изначально включали как резные, так и окрашенные области.Многие скалы из песчаника, затемненные пустынным лаком, естественным пятном из оксидов железа и марганца, служили идеальным полотном для вырезания петроглифов. Большинство этих рисунков представляют собой очертания, но некоторые из них полностью заклеваны, чтобы сформировать твердые фигуры, а некоторые состоят из небольших отверстий в близко расположенных рядах.

Стиль и содержание рисунков Фремонта варьируются в зависимости от региона. В Национальном памятнике динозаврам преобладает «классический весенний стиль». Для этого стиля характерны фигуры, похожие на людей, фигурки животных и абстрактные узоры.Человеческие фигуры обычно имеют трапециевидные тела, которые могут включать или не включать руки, ноги, пальцы рук и ног. Сложные украшения на телах предполагают головные уборы, серьги, ожерелья, щиты или другие предметы.

Фигуры животных включают в себя узнаваемых снежных баранов, птиц, змей и ящериц, а также более абстрактные формы, похожие на животных. Обычны чисто абстрактные или геометрические рисунки, такие как круги, спирали и различные комбинации линий.

Почему Фремонт создали эти рисунки и что они означают? Возможно, рисунки служили какой-то церемониальной или религиозной цели, связанной с охотой, определением кланов или просто выражали воображение художника — а может быть, все или ничего из этого.Попытки интерпретировать рисунки, сравнивая их с недавними группами коренных американцев, могут дать ключ к разгадке, но истинный смысл остается загадкой.

Многие рисунки в памятнике довольно легкодоступны и позволяют рассмотреть их вблизи. Эти конструкции очень хрупкие. Прикосновение к петроглифам и пиктограммам может повредить дизайн, оставив после себя масла, истирающие камень. Следы и трение могут повредить конструкции из мягкого песчаника. По этим причинам, пожалуйста, не трогайте дизайн.

Узнайте больше о культуре Фремонта.

GHS | VWR

Положения и условия

Спасибо, что посетили наш сайт. Эти условия использования применимы к веб-сайтам США, Канады и Пуэрто-Рико (далее «Веб-сайт»), которыми управляет VWR («Компания»). Если вы заходите на веб-сайт из-за пределов США, Канады или Пуэрто-Рико, пожалуйста, посетите соответствующий международный веб-сайт, доступный по адресу www.vwr.com, для ознакомления с применимыми условиями. Все пользователи веб-сайта подчиняются следующим условиям использования веб-сайта (эти «Условия использования»).Пожалуйста, внимательно прочтите эти Условия использования перед доступом или использованием любой части веб-сайта. Заходя на веб-сайт или используя его, вы соглашаетесь с тем, что прочитали, поняли и соглашаетесь соблюдать настоящие Условия использования с внесенными в него время от времени поправками, а также Политику конфиденциальности компании, которая настоящим включена в настоящие Условия. использования. Если вы не желаете соглашаться с настоящими Условиями использования, не открывайте и не используйте какие-либо части веб-сайта.

Компания может пересматривать и обновлять настоящие Условия использования в любое время без предварительного уведомления, разместив измененные условия на веб-сайте.Продолжение использования вами веб-сайта означает, что вы принимаете и соглашаетесь с пересмотренными Условиями использования. Если вы не согласны с Условиями использования (в которые время от времени вносятся поправки) или недовольны Веб-сайтом, ваше единственное и исключительное средство правовой защиты — прекратить использование Веб-сайта.

Использование сайта

Информация, содержащаяся на этом веб-сайте, предназначена только для информационных целей. Хотя считается, что информация верна на момент публикации, вам следует самостоятельно определить ее пригодность для вашего использования.Не все продукты или услуги, описанные на этом веб-сайте, доступны во всех юрисдикциях или для всех потенциальных клиентов, и ничто в настоящем документе не предназначено как предложение или ходатайство в какой-либо юрисдикции или какому-либо потенциальному покупателю, где такое предложение или продажа не соответствует требованиям.

Приобретение товаров и услуг

Настоящие Условия и положения распространяются только на использование веб-сайта. Обратите внимание, что условия, касающиеся обслуживания, продажи продуктов, рекламных акций и других связанных мероприятий, можно найти по адресу https: // us.vwr.com/store/content/externalContentPage.jsp?path=/en_US/about_vwr_terms_and_conditions.jsp, и эти условия регулируют любые покупки продуктов или услуг у Компании.

Интерактивные функции

Веб-сайт может содержать службы досок объявлений, области чата, группы новостей, форумы, сообщества, личные веб-страницы, календари и / или другие средства сообщения или связи, предназначенные для того, чтобы вы могли общаться с общественностью в целом или с группой ( вместе «Функция сообщества»).Вы соглашаетесь использовать функцию сообщества только для публикации, отправки и получения сообщений и материалов, которые являются надлежащими и относятся к конкретной функции сообщества. Вы соглашаетесь использовать веб-сайт только в законных целях.

A. В частности, вы соглашаетесь не делать ничего из следующего при использовании функции сообщества:

1. Опорочить, оскорбить, преследовать, преследовать, угрожать или иным образом нарушать законные права (например, право на неприкосновенность частной жизни и гласность) других.
2. Публиковать, размещать, загружать, распространять или распространять любую неуместную, непристойную, дискредитирующую, нарушающую авторские права, непристойную, непристойную или незаконную тему, название, материал или информацию.
3. Загружайте файлы, содержащие программное обеспечение или другие материалы, защищенные законами об интеллектуальной собственности (или правами на неприкосновенность частной жизни), если только вы не владеете или не контролируете права на них или не получили все необходимое согласие.
4. Загрузите файлы, содержащие вирусы, поврежденные файлы или любое другое подобное программное обеспечение или программы, которые могут повредить работу чужого компьютера.
5. Перехватить или попытаться перехватить электронную почту, не предназначенную для вас.
6. Рекламировать или предлагать продавать или покупать какие-либо товары или услуги для любых деловых целей, если такая функция сообщества специально не разрешает такие сообщения.
7. Проводите или рассылайте опросы, конкурсы, финансовые пирамиды или письма счастья.
8. Загрузите любой файл, опубликованный другим пользователем функции сообщества, который, как вы знаете или разумно должен знать, не может распространяться на законных основаниях таким образом или что у вас есть договорное обязательство сохранять конфиденциальность (несмотря на его доступность на веб-сайте).
9. Подделывать или удалять любые ссылки на автора, юридические или другие надлежащие уведомления, обозначения собственности или ярлыки происхождения или источника программного обеспечения или других материалов, содержащихся в загружаемом файле.
10. Предоставление ложной информации о принадлежности к какому-либо лицу или организации.
11. Участвовать в любых других действиях, которые ограничивают или препятствуют использованию веб-сайта кем-либо или которые, по мнению Компании, могут нанести вред Компании или пользователям веб-сайта или подвергнуть их ответственности.
12. Нарушать любые применимые законы или постановления или нарушать любой кодекс поведения или другие правила, которые могут быть применимы к какой-либо конкретной функции Сообщества.
13. Собирать или иным образом собирать информацию о других, включая адреса электронной почты, без их согласия.

B. Вы понимаете и признаете, что несете ответственность за любой контент, который вы отправляете, вы, а не Компания, несете полную ответственность за такой контент, включая его законность, надежность и уместность. Если вы публикуете сообщения от имени или от имени вашего работодателя или другой организации, вы заявляете и гарантируете, что у вас есть на это право. Загружая или иным образом передавая материалы в любую часть веб-сайта, вы гарантируете, что эти материалы являются вашими собственными или находятся в общественном достоянии или иным образом свободны от проприетарных или иных ограничений, и что вы имеете право размещать их на веб-сайте.Кроме того, загружая или иным образом передавая материал в любую область веб-сайта, вы предоставляете Компании безотзывное, бесплатное право во всем мире на публикацию, воспроизведение, использование, адаптацию, редактирование и / или изменение таких материалов любым способом, в любые средства массовой информации, известные в настоящее время или обнаруженные в будущем, во всем мире, в том числе в Интернете и World Wide Web, для рекламных, коммерческих, торговых и рекламных целей, без дополнительных ограничений или компенсации, если это не запрещено законом, и без уведомления, проверки или одобрения.

C. Компания оставляет за собой право, но не принимает на себя никакой ответственности (1) удалить любые материалы, размещенные на веб-сайте, которые Компания по своему собственному усмотрению сочтет несовместимыми с вышеуказанными обязательствами или иным образом неприемлемыми по любой причине. ; и (2) прекратить доступ любого пользователя ко всему или части веб-сайта. Однако Компания не может ни просмотреть все материалы до того, как они будут размещены на веб-сайте, ни обеспечить быстрое удаление нежелательных материалов после их размещения.Соответственно, Компания не несет ответственности за какие-либо действия или бездействие в отношении передач, сообщений или контента, предоставленных третьими сторонами. Компания оставляет за собой право предпринимать любые действия, которые она сочтет необходимыми для защиты личной безопасности пользователей этого веб-сайта и общественности; тем не менее, Компания не несет ответственности перед кем-либо за выполнение или невыполнение действий, описанных в этом параграфе.

D. Несоблюдение вами положений пунктов (A) или (B) выше может привести к прекращению вашего доступа к веб-сайту и может повлечь за собой гражданскую и / или уголовную ответственность.

Особое примечание о содержании функций сообщества

Любой контент и / или мнения, загруженные, выраженные или отправленные с помощью любой функции сообщества или любого другого общедоступного раздела веб-сайта (включая области, защищенные паролем), а также все статьи и ответы на вопросы, кроме контента, явно разрешенного Компания, являются исключительно мнениями и ответственностью лица, представляющего их, и не обязательно отражают мнение Компании.Например, любое рекомендованное или предлагаемое использование продуктов или услуг, доступных от Компании, которое публикуется через функцию сообщества, не является признаком одобрения или рекомендации со стороны Компании. Если вы решите следовать какой-либо такой рекомендации, вы делаете это на свой страх и риск.

Ссылки на сторонние сайты

Веб-сайт может содержать ссылки на другие веб-сайты в Интернете. Компания не несет ответственности за контент, продукты, услуги или методы любых сторонних веб-сайтов, включая, помимо прочего, сайты, связанные с Веб-сайтом или с него, сайты, созданные на Веб-сайте, или стороннюю рекламу, и не делает заявлений относительно их качество, содержание или точность.Наличие ссылок с веб-сайта на любой сторонний веб-сайт не означает, что мы одобряем, поддерживаем или рекомендуем этот веб-сайт. Мы отказываемся от всех гарантий, явных или подразумеваемых, в отношении точности, законности, надежности или действительности любого контента на любых сторонних веб-сайтах. Вы используете сторонние веб-сайты на свой страх и риск и в соответствии с условиями использования таких веб-сайтов.

Права собственности на контент

Вы признаете и соглашаетесь с тем, что все содержимое веб-сайта (включая всю информацию, данные, программное обеспечение, графику, текст, изображения, логотипы и / или другие материалы) и его дизайн, выбор, сбор, расположение и сборка являются являются собственностью Компании и защищены законами США и международными законами об интеллектуальной собственности.Вы имеете право использовать содержимое веб-сайта только в личных или законных деловых целях. Вы не можете копировать, изменять, создавать производные работы, публично демонстрировать или исполнять, переиздавать, хранить, передавать, распространять, удалять, удалять, дополнять, добавлять, участвовать в передаче, лицензировать или продавать какие-либо материалы в Интернете. Сайт без предварительного письменного согласия Компании, за исключением: (а) временного хранения копий таких материалов в ОЗУ, (б) хранения файлов, которые автоматически кэшируются вашим веб-браузером для улучшения отображения, и (в) печати разумного количество страниц веб-сайта; в каждом случае при условии, что вы не изменяете и не удаляете какие-либо уведомления об авторских правах или других правах собственности, включенные в такие материалы.Ни название, ни какие-либо права интеллектуальной собственности на любую информацию или материалы на веб-сайте не передаются вам, а остаются за Компанией или соответствующим владельцем такого контента.

Товарные знаки

Название и логотип компании, а также все связанные названия, логотипы, названия продуктов и услуг, появляющиеся на веб-сайте, являются товарными знаками компании и / или соответствующих сторонних поставщиков. Их нельзя использовать или повторно отображать без предварительного письменного согласия Компании.

Отказ от ответственности

Компания не несет никакой ответственности за материалы, информацию и мнения, предоставленные или доступные через Веб-сайт («Контент сайта»). Вы полагаетесь на Контент сайта исключительно на свой страх и риск. Компания не несет никакой ответственности за травмы или убытки, возникшие в результате использования любого Контента Сайта.
ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖАНИЕ САЙТА И ПРОДУКТЫ И УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ ИЛИ ДОСТУПНЫЕ ЧЕРЕЗ ВЕБ-САЙТ, ПРЕДОСТАВЛЯЮТСЯ НА УСЛОВИЯХ «КАК ЕСТЬ» И «ПО ДОСТУПНОСТИ», СО ВСЕМИ ОШИБКАМИ.КОМПАНИЯ И НИ ЛИБО, СВЯЗАННОЕ С КОМПАНИЕЙ, НЕ ДАЕТ НИКАКИХ ГАРАНТИЙ ИЛИ ЗАЯВЛЕНИЙ В ОТНОШЕНИИ КАЧЕСТВА, ТОЧНОСТИ ИЛИ ДОСТУПНОСТИ ВЕБ-САЙТА. В частности, НО БЕЗ ОГРАНИЧЕНИЯ ВЫШЕИЗЛОЖЕННОГО, НИ КОМПАНИЯ И НИ ЛИБО, СВЯЗАННОЕ С КОМПАНИЕЙ, НЕ ГАРАНТИРУЕТ ИЛИ ЗАЯВЛЯЕТ, ЧТО ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖАНИЕ САЙТА ИЛИ УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ НА САЙТЕ ИЛИ ЧЕРЕЗ САЙТ, БУДУТ ТОЧНЫМИ, НАДЕЖНЫМИ ИЛИ БЕСПЛАТНЫМИ ИЛИ БЕСПЛАТНЫМИ ЧТО ДЕФЕКТЫ БУДУТ ИСПРАВЛЕНЫ; ЧТО ВЕБ-САЙТ ИЛИ СЕРВЕР, ДЕЛАЮЩИЙ ЕГО ДОСТУПНЫМ, СВОБОДНЫ ОТ ВИРУСОВ ИЛИ ДРУГИХ ВРЕДНЫХ КОМПОНЕНТОВ; ИНАЧЕ ВЕБ-САЙТ ОТВЕЧАЕТ ВАШИМ ПОТРЕБНОСТЯМ ИЛИ ОЖИДАНИЯМ.КОМПАНИЯ ОТКАЗЫВАЕТСЯ ОТ ВСЕХ ГАРАНТИЙ, ЯВНЫХ ИЛИ ПОДРАЗУМЕВАЕМЫХ, ВКЛЮЧАЯ ЛЮБЫЕ ГАРАНТИИ КОММЕРЧЕСКОЙ ЦЕННОСТИ, ПРИГОДНОСТИ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕННОЙ ЦЕЛИ И НЕ НАРУШЕНИЯ.
НИ ПРИ КАКИХ ОБСТОЯТЕЛЬСТВАХ КОМПАНИЯ ИЛИ ЕЕ ЛИЦЕНЗИАРЫ ИЛИ ПОДРЯДЧИКИ НЕ НЕСЕТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ ЗА ЛЮБОЙ ВИД ЛЮБОГО ВИДА УЩЕРБА, ВЫЗВАННОГО ИЛИ В СВЯЗИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ВАМИ ИЛИ НЕВОЗМОЖНОСТЬЮ ИСПОЛЬЗОВАТЬ ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖИМОЕ САЙТА, ЛЮБЫЕ УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ НА САЙТЕ ИЛИ ЧЕРЕЗ ВЕБ-САЙТ ИЛИ ЛЮБОЙ САЙТ, ВКЛЮЧАЮЩИЙ ПРЯМЫЕ, КОСВЕННЫЕ, СЛУЧАЙНЫЕ, СПЕЦИАЛЬНЫЕ, КОСВЕННЫЕ ИЛИ КАРАТНЫЕ УБЫТКИ, ВКЛЮЧАЯ, НО НЕ ОГРАНИЧИВАЯСЯ, ЛИЧНЫЕ ТРАВМЫ, ПОТЕРЯ ПРИБЫЛИ ИЛИ УБЫТКОВ , ВИРУСЫ, УДАЛЕНИЕ ФАЙЛОВ ИЛИ ЭЛЕКТРОННЫХ СООБЩЕНИЙ, ИЛИ ОШИБКИ, УПУЩЕНИЯ ИЛИ ДРУГИЕ НЕТОЧНОСТИ НА ВЕБ-САЙТЕ ИЛИ СОДЕРЖАНИИ САЙТА ИЛИ УСЛУГ, ИЛИ ИЛИ НЕ ИСПОЛЬЗУЕТСЯ КОМПАНИЯ, И ПРЕДОСТАВЛЯЛА ЛИ КОМПАНИЯ ВОЗМОЖНОСТЬ ЛЮБЫЕ ТАКИЕ УБЫТКИ, ЕСЛИ НЕ ЗАПРЕЩЕНЫ ПРИМЕНИМЫМ ЗАКОНОДАТЕЛЬСТВОМ.

Компенсация

Вы соглашаетесь освободить и обезопасить Компанию и ее должностных лиц, директоров, агентов, сотрудников и других лиц, участвующих в работе Веб-сайта, от любых обязательств, расходов, убытков и издержек, включая разумные гонорары адвокатам, возникающих в результате любое нарушение вами настоящих Условий использования, использование вами Веб-сайта или любых продуктов, услуг или информации, полученных с Веб-сайта или через него, ваше подключение к Веб-сайту, любой контент, который вы отправляете на Веб-сайт через любые Функция сообщества или нарушение вами каких-либо прав другого лица.

Применимое право; Международное использование

Настоящие условия регулируются и толкуются в соответствии с законами штата Пенсильвания без учета каких-либо принципов коллизионного права. Вы соглашаетесь с тем, что любые судебные иски или иски, вытекающие из настоящих Условий использования или связанные с ними, будут подаваться исключительно в суды штата или федеральные суды, расположенные в Пенсильвании, и вы тем самым соглашаетесь и подчиняетесь личной юрисдикции таких судов для цели судебного разбирательства по любому подобному действию.
Настоящие Условия использования применимы к пользователям в США, Канаде и Пуэрто-Рико. Если вы заходите на веб-сайт из-за пределов США, Канады или Пуэрто-Рико, пожалуйста, посетите соответствующий международный веб-сайт, доступный по адресу www.vwr.com, для ознакомления с применимыми условиями. Если вы решите получить доступ к этому веб-сайту из-за пределов указанных юрисдикций, а не использовать доступные международные сайты, вы соглашаетесь с настоящими Условиями использования и тем, что такие условия будут регулироваться и толковаться в соответствии с законами США и штата. Пенсильвании и что мы не делаем никаких заявлений о том, что материалы или услуги на этом веб-сайте подходят или доступны для использования в этих других юрисдикциях.В любом случае все пользователи сами несут ответственность за соблюдение местных законов.

Общие условия

Настоящие Условия использования, в которые время от времени могут вноситься поправки, представляют собой полное соглашение и понимание между вами и нами, регулирующее использование вами Веб-сайта. Наша неспособность реализовать или обеспечить соблюдение какого-либо права или положения Условий использования не означает отказ от такого права или положения. Если какое-либо положение Условий использования будет признано судом компетентной юрисдикции недействительным, вы, тем не менее, соглашаетесь с тем, что суд должен попытаться реализовать намерения сторон, отраженные в этом положении и других положениях Условия использования остаются в полной силе.Ни ваши деловые отношения, ни поведение между вами и Компанией, ни какая-либо торговая практика не может считаться изменением настоящих Условий использования. Вы соглашаетесь с тем, что независимо от какого-либо закона или закона об обратном, любые претензии или основания для иска, возникающие из или связанные с использованием Сайта или Условий использования, должны быть поданы в течение одного (1) года после такой претензии или причины. иска возникла или будет навсегда запрещена. Любые права, прямо не предоставленные в настоящем документе, сохраняются за Компанией.Мы можем прекратить ваш доступ или приостановить доступ любого пользователя ко всему сайту или его части без предварительного уведомления за любое поведение, которое мы, по нашему собственному усмотрению, считаем нарушением любого применимого законодательства или наносящим ущерб интересам другого пользователя. , стороннего поставщика, поставщика услуг или нас. Любые вопросы, касающиеся настоящих Условий использования, следует направлять по адресу [email protected].

Жалобы на нарушение авторских прав

Мы уважаем чужую интеллектуальную собственность и просим наших пользователей поступать так же.Если вы считаете, что ваша работа была скопирована и доступна на Сайте способом, который представляет собой нарушение авторских прав, вы можете уведомить нас, предоставив нашему агенту по авторским правам следующую информацию:

• электронная или физическая подпись лица, уполномоченного действовать от имени правообладателя;

• описание работы, защищенной авторским правом, в отношении которой были нарушены ваши претензии;

• идентификация URL-адреса или другого конкретного места на Сайте, где находится материал, который, по вашему мнению, нарушает авторские права;

• ваш адрес, номер телефона и адрес электронной почты;

• заявление, что у вас есть добросовестное предположение, что спорное использование не разрешено владельцем авторского права, его агентом или законом; и

• ваше заявление, сделанное под страхом наказания за лжесвидетельство, о том, что приведенная выше информация в вашем уведомлении является точной и что вы являетесь владельцем авторских прав или уполномочены действовать от имени владельца авторских прав.

С нашим агентом для уведомления о жалобах на нарушение авторских прав на Сайте можно связаться по адресу: [email protected].

Символы и пиктограммы — meteoblue

В этом разделе показаны и объясняются используемые символы.

Символы местоположения

Символы, используемые для категорий местоположения, объясняются в атрибутах местоположения.

Символы риска

Символы риска описаны для карты риска .

Колючки ветра

Здесь вы найдете объяснение ветровых зазубрин, показывающих скорость и направление ветра, которые используются в метеограммах и картах.

Пиктограммы

Погодные условия обозначены пиктограммами. Они показывают солнечный свет, облака, тип осадков, интенсивность и грозы. за период времени, указанный в прогнозе. Подробное описание символа показано ниже. Пиктограммы используются в обзоры как на стартовой странице, так и в метеограммах.Период действия пиктограммы печатается сверху или снизу. Час указывает на конец интервала (например, 3-часовая пиктограмма, обозначенная 11:00, включает прогноз с 8:01 до 11:00, а следующая 3-часовая пиктограмма, отмеченная 14:00, включает прогноз с 11:01 до 14:00).

Пиктограммы день и ночь

Дневные и ночные пиктограммы показывают погодные условия в течение одного или трех часов в течение дня и ночи. ночь. Они содержат более подробное описание погодных условий, чем праздничные пиктограммы, обозначающие суточная сумма погодных условий.

праздничные пиктограммы

праздничных пиктограмм отображают суточные погодные условия. Они используются в фидах данных API и на стартовая страница meteoblue (ежедневный обзор). В потоках данных для прогнозов на 7 дней используются все 17 пиктограмм, данные для кормления в течение 14 дней используются только первые 11 пиктокодов праздника. В потоке данных json также используются 17 пиктокодов праздников.

* Примечание: специальные пиктограммы показаны только на нашем веб-сайте и не включены в API

Как рассчитываются пиктограммы погоды

пиктограммы синего метеобиого цвета показывают наиболее вероятные погодные условия для данного местоположения, основанные на очень подробном анализе местный прогноз (черные квадраты) в области (желтый квадрат).Рассматриваемая территория находится в пределах 20-30 км от выбранной расположение центральной точки (например, зеленые точки: Эвиан на юго-востоке и Морж на северо-западе площади). Для каждой точки рассчитывается другая пиктограмма. Учитываются следующие основные факторы:

• облачность: среднее значение всего облачного покрова в районе.
• интенсивность осадков: среднее количество осадков для выбранного места.
• тип осадков: преобладающие осадки для выбранного места.
• ветер (если отображается): средний или максимальный ветер для выбранного места.

Расчет пиктограммы объединяет региональные и местные прогнозы, чтобы соответствовать нашему восприятию: солнечный свет и облачность воспринимаются регионально, тогда как осадки, ветер и температура воспринимаются локально.

Скачать

Получите наши пиктограммы погоды бесплатно: вы можете использовать их с нашими или со своими данными, разместив ссылку со своей страницы на эта страница. Все права защищены.

meteoblue_weather_pictograms_2016-11-04.zip (4,85 МБ)

Все остальные символы, используемые meteoblue, доступны как шрифт:

meteoblue_pictofont_rev8.zip (284,45 КБ)

Предпочтение целевого сайта для вставок mPing. Пиктограмма была …

Контекст 1

… Популярность сортов Айкоку и Гимбодзу у японских фермеров в первой половине 20 века привела к использованию этих сортов по всей стране и их селекции. из многих различных, но тесно связанных сортов и староместных сортов. В ходе анализа числа копий элементов mPing среди этих местных сортов и других сортов риса мы обнаружили резкое усиление у четырех штаммов.Первым признаком очень высокого числа копий mPing было наблюдение гибридизации мазка, когда меченый mPing использовался для зондирования блотов ДНК, содержащих расщепленную геномную ДНК из 25 штаммов, включая 21 староместную разновидность Aikoku и Gimbozu (рис. 1 A). Очень высокое количество копий в этих штаммах препятствовало использованию гибридизации ДНК-блоттинга для разделения отдельных копий. Вместо этого использовался транспозонный дисплей (TD), чтобы обеспечить лучшую оценку количества копий. TD представляет собой модификацию метода полиморфизма амплифицированных фрагментов (17), при котором геномная ДНК переваривается, лигируется с адаптером и используется в качестве матрицы для ПЦР с меченым праймером, который в данном случае отжигает около одного конца элементов mPing. (11, 18, 19).Все фрагменты ДНК, которые визуализируются на гелях TD, должны иметь адаптерный праймер на одном конце и элемент mPing на другом конце. TD-гель геномной ДНК из 12 штаммов показан на рис. 1В. Для всех показанных штаммов вместе с праймером mPing использовали адаптерный праймер с одним селективным основанием. Поскольку в штаммах с высоким числом копий было слишком много полос для точного подсчета (рис. 1В, дорожки 2 и 23–25), мы использовали адаптерные праймеры с тремя селективными основаниями для штаммов с высоким числом копий и только единая селективная база для других штаммов (данные не показаны).Число копий mPing оценивали для низкокопийных штаммов путем подсчета всех полос, полученных с использованием четырех возможных комбинаций праймеров. (Таблица 2, которая опубликована в качестве вспомогательной информации на веб-сайте PNAS). Точность этого метода для оценки количества копий очевидна при сравнении количества полос, наблюдаемых для контроля Nipponbare (51 копия), с фактическим количеством элементов в практически полной последовательности генома (50 копий) (14). Напротив, количество элементов mPing в штаммах с большим количеством копий (кроме EG4) оценивали путем усреднения количества полос на праймер с использованием 14 из 64 возможных комбинаций праймеров и умножения этого числа на 64.Для EG4 использовали все 64 комбинации праймеров и подсчитывали все полосы. Этот прямой метод позволил получить число копий (1163), которое существенно не отличалось от расчетного числа копий, экстраполированного из результатов с 14 праймерами (1198) (таблица 3, которая опубликована в качестве вспомогательной информации на веб-сайте PNAS). Как показано на рис. 1C, штаммы с высоким числом копий содержат от 840 до 1163 элементов. Ключи к взаимосвязи между этими штаммами и динамикой усиления mPing могут быть выведены путем сравнения паттернов полос на гелях TD.Например, за двумя исключениями (A101 и A102; дорожки 17 и 18 на рис. 1B), все штаммы с низким числом копий и штаммы Nipponbare (рис. 1, дорожка 1) имеют много общих полос, таким образом обнаруживая их очень близкое генетическое родство. Это открытие согласуется с их записями о размножении; Гимбозу — прародитель штамма (Norin 22), который использовался для создания Nipponbare. Эти данные показывают, что геном предков Гимбозу имел распределение mPing, очень похожее на то, что мы видим в существующем Nipponbare. Таким образом, элементы mPing не переносились в эти строки почти столетие.Напротив, тщательное изучение структуры TD-полос штаммов с большим числом копий выявило очень мало комигрирующих полос среди сотен полос, исследованных в каждом штамме (рис. 1B, сравните дорожки 2 и 23-25 ​​и данные не показаны). . Эти данные предполагают, что амплификация mPing происходила независимо в каждом из штаммов с высоким числом копий. Этот сценарий согласуется с тем фактом, что эти штаммы культивировались в разных географически изолированных регионах Японии. Сайты вставки mPing в Rice.Доступность большей части геномной последовательности от двух подвидов риса (14, 15), наряду с большой коллекцией полноразмерных кДНК (20), позволила определить самые ранние стадии интеграции большого числа копий. семейство элементов в генах растений или близко к ним. С этой целью мы определили фланкирующие последовательности-хозяева случайного подмножества вставок mPing в штаммах с высоким числом копий EG4, A119 и A123 путем секвенирования полос из гелей TD после их восстановления и повторной амплификации. Все полосы, выделенные из штаммов с высоким содержанием копий, называются «новыми вставками», чтобы отразить недавнюю амплификацию mPing в этих штаммах.Восстановленные последовательности были использованы для запроса аннотированной базы данных генома риса Национального центра биотехнологической информации (www. Ncbi.nlm.nih.gov). Подобно другим туристическим клещам, mPing нацелен на тринуклеотид TAA (и его комплемент TTA), который затем дублируется при вставке (рис. 2). Поскольку другой туристический клещ, элемент mPIF кукурузы, имеет значительное предпочтение в отношении целевого сайта длиной 9 пар оснований (который включает и фланкирует TAA ͞ TTA) (21), наш анализ был расширен на три нуклеотида выше и ниже тринуклеотида. .Слабое предпочтение было очевидно для последовательности C ͞ T T A ͞ C T T ͞ A A G ͞ T A A G (рис. 2). Примечательно, что гораздо более сильное предпочтение 9 bp элемента mPIF совпадает с предпочтением mPing. Также был проведен обширный анализ геномных «окрестностей» 280 вставок, и результаты суммированы в таблице 1. Считалось, что сайт вставки находится в области генома риса с единственной копией, если поиск BLAST ударил только один клон BAC (за исключением перекрытий), тогда как запросы с более чем двумя значительными совпадениями считались находящимися в повторяющихся областях (22).Кроме того, близость каждого сайта вставки к транскрибируемой области оценивалась путем извлечения 5 т.п.н., фланкирующих каждый конец mPing, и использования этих последовательностей для запроса коллекций полноразмерных кДНК в основанной на знаниях Молекулярной биологической энциклопедии Oryza (KOME, http: ͞͞) cdna01.dna.affrc.go.jp ͞ кДНК) (см. Материалы и методы) (20). Подавляющее большинство проанализированных вставок приходилось на участки с одной копией и близкую к транскрибированной ДНК. Для EG4 201 из 221 сайта вставки mPing (91%) находился в областях с одной копией (таблица 1).Хотя было извлечено меньшее количество вставок из штаммов A119 и A123, Ͼ 90% проанализированных образцов находились в областях с одной копией. Что касается генной близости, 70% новых вставок mPing (195 из 256) составляют 5 т.п.н. от кодирующей последовательности кДНК (рис. 3, таблица 1 и таблица 4, которые опубликованы в качестве вспомогательной информации на веб-сайте PNAS). ), и из этих 195 вставок 1 находится в экзоне, 10 — в интронах и 46 — в пределах 1 т.п.н. от кодирующей области. Хотя в гены очень мало новых вставок, в пределах 5 т.п.н. от гена имеется значительно больше новых вставок (70%), чем предположительно более старых вставок в Nipponbare (44%; P ϭ 0.002) (таблицы 1 и 4; и см. Таблицу 5, которая опубликована в качестве дополнительной информации на веб-сайте PNAS). Был проведен контрольный эксперимент, чтобы определить, были ли новые вставки преимущественно в генных и 1/4 или однокопийных областях. С этой целью геномное окружение новых вставок mPing сравнивали с таковым у 300 случайно выбранных контрольных последовательностей, и данные подвергали анализу на случай непредвиденных обстоятельств (таблицы 1 и 5). Все проанализированные штаммы риса показали значительно более высокую частоту вставок mPing в области с одной копией, чем в контроле.Напротив, контрольные фрагменты чаще находились внутри генов (таблицы 1 и 5). Существенная недостаточная представленность генных совпадений среди новых сайтов вставки mPing предполагает, что такие вставки были выбраны за очень короткое время после амплификации mPing. Быстрое удаление генных вставок из популяции, скорее всего, объясняется тем, что рис является самоудобрением и что большинство локусов гомозиготны. ПЦР-анализ 50 случайно выбранных новых сайтов вставки показал, что пять вставок были гетерозиготными (см. Материалы и методы и данные не показаны).Такая ситуация может возникнуть, если инсерционный аллель еще не зафиксирован в популяции и ͞ или если mPing все еще активно транспонирует (см. Ниже). Транскрипты mPing-содержащих генов. Предыдущее исследование показало, что вставка mPing в интрон риса, гомолога гена CONSTANS, отвечает за мутантный фенотип, предположительно из-за аберрантного альтернативного сплайсинга mPing-содержащего интрона (16). Влияние, если таковое имеется, новых вставок mPing в гены или рядом с ними в штаммах с большим количеством копий было исследовано путем сравнения транскриптов, продуцируемых аллелями с mPing и без него.Выбранные аллели представляли то, что мы считали лучшими кандидатами на измененную экспрессию генов среди всех проанализированных новых вставок (рис. 3). С этой целью был проведен анализ RT-PCR для 13 генов со вставками mPing в экзоны или интроны или в пределах 200 п.н. от попадания кДНК и с использованием в качестве матрицы РНК, экстрагированной из листьев EG4 и Nipponbare (рис. 3, см. Рис. расположение вставок mPing и праймеров для ПЦР). Из 13 генов 4 не экспрессировались в листьях ни одного из штаммов (рис. 4).Транскрипты были обнаружены для 7 генов, но между EG4 и Nipponbare не наблюдалось значительной разницы в размере или количестве транскриптов (рис. 4). Для 2 генов (рис. 4, 1 и 9) воспроизводимо более низкие уровни продукта были обнаружены в EG4, чем в Nipponbare, тогда как ген 8 показал воспроизводимо больше продукта в EG4, чем в Nipponbare. Несмотря на эти очевидные количественные различия, мы были удивлены тем, что все аллели, содержащие mPing, которые можно было проанализировать, были транскрибированы и что никаких значительных изменений сплайсинга не наблюдалось.Потребуются дополнительные эксперименты с использованием РНК, выделенной из разных тканей или из растений, выращенных по разным схемам, чтобы увидеть, являются ли какие-либо вставки …

Контекст 2

… мы обнаружили резкую амплификацию в четырех штаммах . Первым признаком очень высокого числа копий mPing было наблюдение гибридизации мазка, когда меченый mPing использовался для зондирования блотов ДНК, содержащих расщепленную геномную ДНК из 25 штаммов, включая 21 староместную разновидность Aikoku и Gimbozu (рис.1 А). Очень высокое количество копий в этих штаммах препятствовало использованию гибридизации ДНК-блоттинга для разделения отдельных копий. Вместо этого использовался транспозонный дисплей (TD), чтобы обеспечить лучшую оценку количества копий. TD представляет собой модификацию метода полиморфизма амплифицированных фрагментов (17), при котором геномная ДНК переваривается, лигируется с адаптером и используется в качестве матрицы для ПЦР с меченым праймером, который в данном случае отжигает около одного конца элементов mPing. (11, 18, 19). Все фрагменты ДНК, которые визуализируются на гелях TD, должны иметь адаптерный праймер на одном конце и элемент mPing на другом конце.TD-гель геномной ДНК из 12 штаммов показан на рис. 1В. Для всех показанных штаммов вместе с праймером mPing использовали адаптерный праймер с одним селективным основанием. Поскольку в штаммах с высоким числом копий было слишком много полос для точного подсчета (рис. 1В, дорожки 2 и 23–25), мы использовали адаптерные праймеры с тремя селективными основаниями для штаммов с высоким числом копий и только единая селективная база для других штаммов (данные не показаны). Число копий mPing оценивали для низкокопийных штаммов путем подсчета всех полос, полученных с использованием четырех возможных комбинаций праймеров.(Таблица 2, которая опубликована в качестве вспомогательной информации на веб-сайте PNAS). Точность этого метода для оценки количества копий очевидна при сравнении количества полос, наблюдаемых для контроля Nipponbare (51 копия), с фактическим количеством элементов в практически полной последовательности генома (50 копий) (14). Напротив, количество элементов mPing в штаммах с большим количеством копий (кроме EG4) оценивали путем усреднения количества полос на праймер с использованием 14 из 64 возможных комбинаций праймеров и умножения этого числа на 64.Для EG4 использовали все 64 комбинации праймеров и подсчитывали все полосы. Этот прямой метод позволил получить число копий (1163), которое существенно не отличалось от расчетного числа копий, экстраполированного из результатов с 14 праймерами (1198) (таблица 3, которая опубликована в качестве вспомогательной информации на веб-сайте PNAS). Как показано на рис. 1C, штаммы с высоким числом копий содержат от 840 до 1163 элементов. Ключи к взаимосвязи между этими штаммами и динамикой усиления mPing могут быть выведены путем сравнения паттернов полос на гелях TD.Например, за двумя исключениями (A101 и A102; дорожки 17 и 18 на рис. 1B), все штаммы с низким числом копий и штаммы Nipponbare (рис. 1, дорожка 1) имеют много общих полос, таким образом обнаруживая их очень близкое генетическое родство. Это открытие согласуется с их записями о размножении; Гимбозу — прародитель штамма (Norin 22), который использовался для создания Nipponbare. Эти данные показывают, что геном предков Гимбозу имел распределение mPing, очень похожее на то, что мы видим в существующем Nipponbare. Таким образом, элементы mPing не переносились в эти строки почти столетие.Напротив, тщательное изучение структуры TD-полос штаммов с большим числом копий выявило очень мало комигрирующих полос среди сотен полос, исследованных в каждом штамме (рис. 1B, сравните дорожки 2 и 23-25 ​​и данные не показаны). . Эти данные предполагают, что амплификация mPing происходила независимо в каждом из штаммов с высоким числом копий. Этот сценарий согласуется с тем фактом, что эти штаммы культивировались в разных географически изолированных регионах Японии. Сайты вставки mPing в Rice.Доступность большей части геномной последовательности от двух подвидов риса (14, 15), наряду с большой коллекцией полноразмерных кДНК (20), позволила определить самые ранние стадии интеграции большого числа копий. семейство элементов в генах растений или близко к ним. С этой целью мы определили фланкирующие последовательности-хозяева случайного подмножества вставок mPing в штаммах с высоким числом копий EG4, A119 и A123 путем секвенирования полос из гелей TD после их восстановления и повторной амплификации. Все полосы, выделенные из штаммов с высоким содержанием копий, называются «новыми вставками», чтобы отразить недавнюю амплификацию mPing в этих штаммах.Восстановленные последовательности были использованы для запроса аннотированной базы данных генома риса Национального центра биотехнологической информации (www. Ncbi.nlm.nih.gov). Подобно другим туристическим клещам, mPing нацелен на тринуклеотид TAA (и его комплемент TTA), который затем дублируется при вставке (рис. 2). Поскольку другой туристический клещ, элемент mPIF кукурузы, имеет значительное предпочтение в отношении целевого сайта длиной 9 пар оснований (который включает и фланкирует TAA ͞ TTA) (21), наш анализ был расширен на три нуклеотида выше и ниже тринуклеотида. .Слабое предпочтение было очевидно для последовательности C ͞ T T A ͞ C T T ͞ A A G ͞ T A A G (рис. 2). Примечательно, что гораздо более сильное предпочтение 9 bp элемента mPIF совпадает с предпочтением mPing. Также был проведен обширный анализ геномных «окрестностей» 280 вставок, и результаты суммированы в таблице 1. Считалось, что сайт вставки находится в области генома риса с единственной копией, если поиск BLAST ударил только один клон BAC (за исключением перекрытий), тогда как запросы с более чем двумя значительными совпадениями считались находящимися в повторяющихся областях (22).Кроме того, близость каждого сайта вставки к транскрибируемой области оценивалась путем извлечения 5 т.п.н., фланкирующих каждый конец mPing, и использования этих последовательностей для запроса коллекций полноразмерных кДНК в основанной на знаниях Молекулярной биологической энциклопедии Oryza (KOME, http: ͞͞) cdna01.dna.affrc.go.jp ͞ кДНК) (см. Материалы и методы) (20). Подавляющее большинство проанализированных вставок приходилось на участки с одной копией и близкую к транскрибированной ДНК. Для EG4 201 из 221 сайта вставки mPing (91%) находился в областях с одной копией (таблица 1).Хотя было извлечено меньшее количество вставок из штаммов A119 и A123, Ͼ 90% проанализированных образцов находились в областях с одной копией. Что касается генной близости, 70% новых вставок mPing (195 из 256) составляют 5 т.п.н. от кодирующей последовательности кДНК (рис. 3, таблица 1 и таблица 4, которые опубликованы в качестве вспомогательной информации на веб-сайте PNAS). ), и из этих 195 вставок 1 находится в экзоне, 10 — в интронах и 46 — в пределах 1 т.п.н. от кодирующей области. Хотя в гены очень мало новых вставок, в пределах 5 т.п.н. от гена имеется значительно больше новых вставок (70%), чем предположительно более старых вставок в Nipponbare (44%; P ϭ 0.002) (таблицы 1 и 4; и см. Таблицу 5, которая опубликована в качестве дополнительной информации на веб-сайте PNAS). Был проведен контрольный эксперимент, чтобы определить, были ли новые вставки преимущественно в генных и 1/4 или однокопийных областях. С этой целью геномное окружение новых вставок mPing сравнивали с таковым у 300 случайно выбранных контрольных последовательностей, и данные подвергали анализу на случай непредвиденных обстоятельств (таблицы 1 и 5). Все проанализированные штаммы риса показали значительно более высокую частоту вставок mPing в области с одной копией, чем в контроле.Напротив, контрольные фрагменты чаще находились внутри генов (таблицы 1 и 5). Существенная недостаточная представленность генных совпадений среди новых сайтов вставки mPing предполагает, что такие вставки были выбраны за очень короткое время после амплификации mPing. Быстрое удаление генных вставок из популяции, скорее всего, объясняется тем, что рис является самоудобрением и что большинство локусов гомозиготны. ПЦР-анализ 50 случайно выбранных новых сайтов вставки показал, что пять вставок были гетерозиготными (см. Материалы и методы и данные не показаны).Такая ситуация может возникнуть, если инсерционный аллель еще не зафиксирован в популяции и ͞ или если mPing все еще активно транспонирует (см. Ниже). Транскрипты mPing-содержащих генов. Предыдущее исследование показало, что вставка mPing в интрон риса, гомолога гена CONSTANS, отвечает за мутантный фенотип, предположительно из-за аберрантного альтернативного сплайсинга mPing-содержащего интрона (16). Влияние, если таковое имеется, новых вставок mPing в гены или рядом с ними в штаммах с большим количеством копий было исследовано путем сравнения транскриптов, продуцируемых аллелями с mPing и без него.Выбранные аллели представляли то, что мы считали лучшими кандидатами на измененную экспрессию генов среди всех проанализированных новых вставок (рис. 3). С этой целью был проведен анализ RT-PCR для 13 генов со вставками mPing в экзоны или интроны или в пределах 200 п.н. от попадания кДНК и с использованием в качестве матрицы РНК, экстрагированной из листьев EG4 и Nipponbare (рис. 3, см. Рис. расположение вставок mPing и праймеров для ПЦР). Из 13 генов 4 не экспрессировались в листьях ни одного из штаммов (рис. 4).Транскрипты были обнаружены для 7 генов, но между EG4 и Nipponbare не наблюдалось значительной разницы в размере или количестве транскриптов (рис. 4). Для 2 генов (рис. 4, 1 и 9) воспроизводимо более низкие уровни продукта были обнаружены в EG4, чем в Nipponbare, тогда как ген 8 показал воспроизводимо больше продукта в EG4, чем в Nipponbare. Несмотря на эти очевидные количественные различия, мы были удивлены тем, что все аллели, содержащие mPing, которые можно было проанализировать, были транскрибированы и что никаких значительных изменений сплайсинга не наблюдалось.Потребуются дополнительные эксперименты с использованием РНК, выделенной из разных тканей или из растений, выращенных при различных режимах, чтобы увидеть, ответственны ли какие-либо из вставок за более тонкие изменения транскрипции.