Разное

Растение вектор: Изображения Растения вектор | Бесплатные векторы, стоковые фото и PSD

03.07.2021

Содержание

%d1%80%d0%b0%d1%81%d1%82%d0%b5%d0%bd%d0%b8%d0%b5 PNG, векторы, PSD и пнг для бесплатной загрузки

  • Мемфис дизайн геометрические фигуры узоры мода 80 90 х годов

    4167*4167

  • поп арт 80 х патч стикер

    3508*2480

  • схема бд электронный компонент технологии принципиальная схема технологическая линия

    2000*2000

  • аудиокассета изолированные вектор старая музыка ретро плеер ретро музыка аудиокассета 80 х пустой микс

    5000*5000

  • поп арт 80 х патч стикер

    3508*2480

  • Мемфис шаблон 80 х 90 х годов стилей фона векторные иллюстрации

    4167*4167

  • 80 летний юбилей дизайн шаблона векторные иллюстрации

    4083*4083

  • 80 основных форм силуэта

    5000*5000

  • поп арт 80 х патч стикер

    3508*2480

  • поп арт 80 х патч стикер

    3508*2480

  • поп арт 80 х патч стикер

    2292*2293

  • Мемфис бесшовные модели 80 х 90 х стилей

    4167*4167

  • рисованной радио 80 х

    1200*1200

  • поп арт 80 х патч стикер

    3508*2480

  • поп арт 80 х патч стикер

    3508*2480

  • поп арт 80 х патч стикер

    2292*2293

  • Мемфис шаблон 80 х 90 х годов на белом фоне векторная иллюстрация

    4167*4167

  • 80 е брызги краски дизайн текста

    1200*1200

  • Мемфис бесшовные модели 80 х 90 х стилей

    4167*4167

  • ТВ игра 80 х в стиле ретро

    1200*1200

  • в первоначальном письме bd логотипа

    1200*1200

  • Персонаж из партии 80 х годов

    1200*1200

  • непрерывный рисунок одной линии старого телефона винтаж 80 х 90 х годов стиль вектор ретро дизайн минимализм с цветом

    3967*3967

  • 80 летняя лента годовщина

    5000*3000

  • поп арт 80 х патч стикер

    3508*2480

  • в эти выходные только мега продажи баннер скидки до 80 с

    10418*10418

  • 80 х годов поп арт мультфильм банановая наклейка

    8334*8334

  • 80 е в стиле ретро ​​мода цвет градиент арт дизайн

    1200*1200

  • три группы 3d реалистичное декоративное яйцо с золотым цветом на гнезде bd с золотым всплеском текстовый баннер

    5000*5000

  • диско дизайн в стиле ретро 80 х неон

    5556*5556

  • Мода цвет 80 х годов ретро вечеринка слово искусства

    1200*1200

  • Ретро мода 80 х градиент цвета художественного слова

    1200*1200

  • 80 летний юбилей дизайн шаблона векторные иллюстрации

    4083*4083

  • bd письмо 3d круг логотип

    1200*1200

  • Ретро стиль 80 х годов вечеринка арт дизайн

    1200*1200

  • облака комиксов

    5042*5042

  • в первоначальном письме bd шаблон векторный дизайн логотипа

    1200*1200

  • милая ретро девушка 80 х 90 х годов

    800*800

  • Трехмерная ретро игра в стиле 80 х арт дизайн

    1200*1200

  • Рождество 80 х годов ретро пиксель

    9449*5315

  • ретро стиль 80 х годов диско дизайн неон плакат

    5556*5556

  • Кассета для вечеринок в стиле ретро 80 х

    1200*1200

  • Флаер музыкального мероприятия 80 х годов

    1200*1200

  • мемфис бесшовной схеме 80s 90 все стили

    4167*4167

  • 80 основных форм гранж

    1200*1200

  • Кампус Лайф 80 Ретро Пиксель Винд Баскетбол

    3543*4724

  • Ретро музыка вечеринка 80 современный стиль искусства слова

    1200*1200

  • Градиент ретро 80 х годов дискотека тема слово искусство

    1200*1200

  • Шаблон градиент 80 х годов диско тема слово дизайн

    1200*1200

  • Элементы рок н ролла 80 х

    1200*1200

  • Иконки «Злаковые растения» — скачай бесплатно PNG и вектор

    Gluten

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Посадка растения

    + В коллекцию

    Gardening Plant

    + В коллекцию

    Gardening Plant

    + В коллекцию

    Gardening Plant

    + В коллекцию

    Dandelion

    + В коллекцию

    Dandelion

    + В коллекцию

    Dandelion

    + В коллекцию

    Dandelion

    + В коллекцию

    Dandelion

    + В коллекцию

    Dandelion

    + В коллекцию

    Dandelion

    + В коллекцию

    Dandelion

    + В коллекцию

    Dandelion

    + В коллекцию

    Dandelion

    + В коллекцию

    Dandelion

    + В коллекцию

    Dandelion

    + В коллекцию

    Spinach

    + В коллекцию

    Spinach

    + В коллекцию

    Spinach

    + В коллекцию

    Spinach

    + В коллекцию

    Spinach

    + В коллекцию

    Spinach

    + В коллекцию

    Spinach

    + В коллекцию

    Spinach

    + В коллекцию

    Spinach

    + В коллекцию

    Spinach

    + В коллекцию

    Spinach

    + В коллекцию

    Spinach

    + В коллекцию

    Spinach

    + В коллекцию

    Вирусы в качестве векторов растений

        В качестве векторов могут также использоваться вирусы растений.
    Их нуклеиновые кислоты реплицируются и проявляют свои функциональные свойства (экспрессируют) в клетках растений-хозяев, где потенциал вирусов и воспринимающих клеток объединяется и реализуется в приумножении организованных частиц патогена (например, для вируса мозаики табака в среднем Ю частиц на клетку, для вируса мозаики цветной капусты — порядка i частиц на клетку). [c.513]
        Полученный целевой ген с помощью ферментов лигаз сшивают с другим геном, который используется в качестве вектора для встраивания гибридного гена в клетку. В качестве вектора могут служить плазмиды, бактериофаги, вирусы человека, животных и растений. 
    [c.99]

        В случае использования в качестве векторов вирусов человека, животных и растений чужеродный ген встраивают в ДНК вируса, и он реплицируется вместе с размножением последнего в клетке. Применяют в качестве вектора космиды, представляющие собой гибрид плазмиды с фагом. Космиды используются для клонирования больших (до 45 тыс. пар нуклеотидов) фрагментов ДНК эукариот. [c.99]

        Высокий уровень экспрессии встроенного гена, быстрая аккумуляция значительных количеств чужеродного белка и вследствие этого простота его очистки делают вирусы растений привлекательными векторами для переноса генов. Вирусы растений имеют более широкий круг хозяев, чем агробактерии, что позволяет экспрессировать ген в разных видах растений с помощью одной и той же векторной конструкции. Кроме того, если антиген многократно экспонирован на поверхности вирусных частиц, его иммуногенность с)Ш] ественно повышается. В качестве носителей для антигенных пептидов используют белки оболочки вирусов табачной мозаики, мозаики коровьего гороха, мозаики вигны китайской, мозаики люцерны и некоторых других вирусов. 

    [c.475]

        Векторы на основе ДНК-содержанщх вирусов растений. Вирусы можно рассматривать как разновидности чужеродной нуклеиновой кислоты, которые реплицируются и экспрессируются в клетках растений.

    Подавляющее большинство фитовирусов в качестве носителя генетической информации содержат РНК. Только 1 — 2 % вирусов, инфицирующих растения, относятся к ДНК-содержа-щим. Именно эти вирусы удобны для использования в технологии рекомбинантных ДНК, а также в качестве векторов. [c.147]

        Растительные клетки не содержат собственных плазмид. В этом случае в качестве основы для конструирования трансформирующих векторных систем в принципе могут использоваться независимо реплицирующиеся геномы различных растительных вирусов. Такие системы были созданы на основе генома вируса мозаики цветной капусты. Однако все наиболее соверщенные системы векторов растений получены на основе плазмид из семейства необычных бактериальных плазмид, носящих название pTi. Эти плазмиды образуют природную систему трансформации, с помощью которой осуществляется перенос сегаентов плазмидной ДНК в геномы разнообразных двудольных растений. 

    [c.273]

        Векторы на основе ДНК-содержащнх вирусов растений. Подавляющее большинство фитовирусов в качестве носителя генетической информации содержат РНК. Лишь 1—2 % от числа вирусов, инфицирую-56 [c.56]

        Подавляющее большинство вирусов растений являются вирусами с одноцепочечной РНК и реплицируются в цитоплазме клетки. Вирусы в растениях накапливаются до высоких концентраций, поэтому заманчиво использовать их в качестве многокопийных экспрессирующих векторов. При этом генно-инженерные манипуляции по встройке целевых последовательностей в вирусный геном осуществляют на клонированных в бактериальных плазмидах ДНК-ко-пиях вирусных РНК. ДНК-копию в плазмиде встраивают между промотором и терминатором транскрипции фага (например Т7). С помощью фаговой РНК-полимеразы in vitro синтезируют РНК-транскрипты гибридных ДНК и трансфицируют ими протопласты или ткани растения. 

    [c.475]


    рекомбинантный вирусный вектор и система экспрессии в клетках растения гибридного белка, включающего внеклеточный домен белка м2 вируса гриппа, присоединенный к ядерному антигену вируса гепатита в — патент РФ 2460796

    Изобретение относится к области биотехнологии.

    Сконструирован оптимизированный для экспрессии в клетках растений синтетический ген, кодирующий гибридный белок М2ерНВс, включающий внеклеточный домен белка М2 вируса гриппа, присоединенный к ядерному антигену вируса гепатита В. Для продукции этого белка в растениях сконструирован рекомбинантный вирус-вектор на основе генома X-вируса картофеля. Фрагмент генома X вируса картофеля, в который была помещена последовательность гена, кодирующего М2ерНВс, был клонирован под контролем активного в клетках растений промотора, вся конструкция клонирована в пределах т-ДНК области бинарного агробактериального вектора. Вирусный вектор и система экспрессии могут быть использованы для недорогой и эффективной продукции в растениях вирусоподобных частиц на основе ядерного антигена вируса гепатита В, представляющих на своей поверхности полипептиды внеклеточного домена М2 белка вируса гриппа, которые могут являться основой для создания рекомбинантной противогриппозной вакцины. 2 н. и 5 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 5 пр.

    Формула изобретения

    1. Рекомбинантный вирусный вектор для продукции в растениях гибридного белка, содержащего показанную на фиг.1 аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1 и включающего внеклеточный домен белка М2 вируса гриппа, присоединенный к ядерному антигену вируса гепатита В, содержащий следующие последовательно расположенные элементы: функционально активный в клетках растения промотор, 5′-нетранслирумый участок генома Х-вируса картофеля, ген полимеразы X-вируса картофеля, первый промотор субгеномной РНК Х-вируса картофеля, нуклеотидная последовательность, кодирующая гибридный белок, включающий внеклеточный домен белка М2 вируса гриппа, присоединенный к ядерному антигену вируса гепатита В, 3′-нетранслируемый участок генома Х-вируса картофеля и терминатор транскрипции.

    2. Рекомбинантный вирусный вектор по п.1, в который между первым промотором субгеномной РНК Х-вируса картофеля и нуклеотидной последовательностью, кодирующей гибридный белок, включающий внеклеточный домен белка М2 вируса гриппа, присоединенный к ядерному антигену вируса гепатита В, введена нуклеотидная последовательность, соответствующая последовательности 5′-нетранслируемого участка РНК вируса мозаики люцерны.

    3. Рекомбинантный вирусный вектор по п.2, в котором промотор представляет собой промотор гена 35S РНК вируса мозаики цветной капусты.

    4. Рекомбинантный вирусный вектор по п.3, в котором терминатор транскрипции представлен терминатором гена 35S РНК вируса мозаики цветной капусты.

    5. Рекомбинантный вирусный вектор по п.4, представляющий собой плазмиду pA7248amvM2epHBc, в которой элементы объединены между собой как показано на фиг.2, а нуклеотидная последовательность, кодирующая гибридный белок, включающий внеклеточный домен белка М2 вируса гриппа, присоединенный к ядерному антигену вируса гепатита В, представляет собой нуклеотидную последовательность SEQ ID NO:2.

    6. Система экспрессии гибридного белка, включающего внеклеточный домен белка М2 вируса гриппа, присоединенный к ядерному антигену вируса гепатита, в клетках растения, представляющего собой растение Nicotiana benthamiana, в клетки которого введен фрагмент рекомбинантного вирусного вектора по п.1, включающий функционально активный в клетках растений промотор, 5′-нетранслирумый участок генома Х-вируса картофеля, ген полимеразы Х-вируса картофеля, первый промотор субгеномной РНК Х-вируса картофеля, нуклеотидную последовательность, кодирующую гибридный белок, включающий внеклеточный домен белка М2 вируса гриппа, присоединенный к ядерному антигену вируса гепатита В, 3′-нетранслируемый участок генома Х-вируса картофеля и терминатор транскрипции.

    7. Система экспрессии по п.6, представляющая собой растение Nicotiana benthamiana, в клетки которого с использованием бактерии Agrobacterium tumefaciens введен фрагмент рекомбинантного вирусного вектора pA7248amvM2epHBc, показанный как т-ДНК на фиг.2.

    Описание изобретения к патенту

    Область применения

    Изобретение относится к иммунологии и биотехнологии, в частности к методам получения иммуногенных препаратов и вакцин, которые могут быть использованы для профилактики гриппа.

    Актуальность

    Грипп является одним из наиболее распространенных инфекционных заболеваний человека и животных. Гриппозная инфекция часто протекает тяжело и иногда приводит к смертельному исходу. Некоторые штаммы вируса, например «испанка» в 1918-1920 годах, способны вызывать пандемии в мировом масштабе, сопровождающиеся высокой смертностью. Высокая изменчивость поверхностных белков вируса, гемаглютинина и нейраминидазы, приводит к возникновению нового эпидемического штамма каждые 1-2 года, с такой же частотой требуется изготовление «стандартных» штамм-специфических вакцин. Используемые в настоящее время противогриппозные вакцины основаны на получаемом в куриных эмбрионах вирусе гриппа или его компонентах [Nicholson K., Webster R., Hay A. (1998) Textbook of Influenza // Oxford, Blackwell Science]. Высокая изменчивость поверхностных белков вируса, гемаглютинина и нейраминидазы приводит к возникновению нового эпидемического штамма каждые 1-2 года [Webster et al., (1992), Microbiol. Rev.56. P.152-179], с такой же частотой требуется изготовление «стандартных» штамм-специфических вакцин.

    Альтернативой традиционным вакцинам являются рекомбинантные вакцины, основанные на отдельных белках вируса гриппа, которые могут быть получены в стандартных организмах-продуцентах. Использование рекомбинантных вакцин не только снимает зависимость производства от куриных эмбрионов и решает проблемы безопасности, общие для вакцин, основанных на цельном патогене, но и открывает возможности создания «универсальных» вакцин при использовании консервативных белков вируса. Более того, такой подход позволяет, с одной стороны, подготовить вакцину очень быстро или создавать вакцины, которые «перекрывают» антигенные свойства большинства пандемических вирусов.

    Поэтому задача создания рекомбинантной вакцины против гриппа продолжает являться актуальной.

    Уровень техники

    Современные противогриппозные вакцины

    В таблице представлен перечень и характеристики противогриппозных вакцин, зарегистрированных и использующихся в России.

    Все вакцины могут быть разделены на следующие типы:

    1. Живые.

    2. Инактивированные,

    — цельновирионные,

    — расщепленные,

    — субъединичные.

    Из этого перечня видно, что для таких актуальных вакцин, как противогриппозные, вообще не разрабатывались рекомбинантные эпитопные вакцины. Однако преимущество генно-инженерных технологий в решении проблем эффективности и безопасности гриппозных вакцин очевидны, и их можно перечислить в следующем порядке по степени важности:

    1. Гарантированно полное отсутствие яичного белка (овальбумина) — основного аллергена в современных вакцинах.

    2. Индивидуальность избранных эпиотопов — гарантии отсутствия аутоиммунных реакций и осложнений. Эта опасность особенно велика для живых и цельновирионных вакцин и не исключается для субъединичных.

    3. Относительная простота производства, отсутствие зависимости от природного сырья, например куриных эмбрионов, и полное соответствие требования безопасности (отсутствие вирусных компонентов). Хорошие экономические показатели производства.

    4. Возможность быстрого развертывания масштабного производства на случай роста потребностей в вакцине в предпандемический и пандемический периоды.

    Вакцины для профилактики гриппа отечественного и зарубежного производства, применяемые в России.
    ВакциныПрепараты и их производители Возраст прививаемых, схемы
    Живая гриппозная вакцина (ЖГВ) ЖГВ (для детей и взрослых), ФГУП «Микроген», г.Иркутск Дети с 3 лет и взрослые по 0,5 мл однократно интразально
    Инактивированная гриппозная вакцина (ИГВ), цельновирионная Вакцина гриппозная инактивированная, ФГУП «Микроген» г. Уфа; ГРИППОВАК, предпр. СПб НИИВС Дети с 7 лет, подростки и взрослые — по 0,5 мл двукратно интраназально с интервалом 3-4 недели; Взрослые с 18 лет по 0,5 мл однократно парентерально
    Инактивированная гриппозная вакцина (ИГВ), расщепленная Флюарикс, SmithKline Beecham (Германия) Дети с 6 месяцев до 6 лет по 0,25 мл двукратно парентерально с интервалом 4-6 недель, Дети старше 6 лет и взрослые по 0,5 мл однократно парентерально
    Ваксигрипп, Sanofi Pasteur- (Франция) То же
    Бегривак, Chiron Behring (Германия) То же
    Флюваксин (Китай)То же
    Инактивированная гриппозная вакцина (ИГВ), субъединичная Инфлювак, Solvay Duphar (Нидерланды)То же
    Агриппал S1, Chiron Behring (Италия) То же
    Инфлексал V, (виросомальная) Berna (Швейцария) То же
    Гриппол, ФГУП «Микроген», г.Уфа Дети с 6 месяцев до 3 лет 0, 25 мл, дети старше 3 лет и взрослые по 0,5 мл парентерально
    Гриппол плюс ООО ФК «Петровакс» Москва Дети с 3 лет и взрослые по 0,5 мл однократно парентерально
    Гриппол Нео, ООО ФК «Петровакс» Москва Взрослые по 0,5 мл однократно парентерально

    Биологически-активные наноструктуры на основе капсидов вирусов животных

    Способность биологических макромолекул к самосборке и самоорганизации является одной из отличительных черт живых систем и предоставляет поистине неисчерпаемые возможности для использования биомолекул в качестве «строительных» блоков «молекулярного конструктора» для направленного создания новых наноархитектур, с заданными пространственными и функциональными свойствами. Одним из наиболее ярких примеров таких структур, обладающих четкой симметрией, обширными возможностями направленной модификации современными методами генной инженерии являются вирусные частицы.

    Высокая стабильность рекомбинантных вирусноподобных частиц (VLP), их симметричная пространственная организация, легкость получения и очистки VLP, их безопасность, возможности направленной модификации структурных белков вирусов методами генной инженерии делают эти частицы идеальными векторами-носителями для представления чужеродных функционально-значимых пептидов и целых белков. Представление антигенных детерминант-эпитопов на поверхности VLP обеспечивает их высокую иммуногенность за счет использования вириона в качестве адьюванта в сочетании с высоким выходом, легкостью очистки и стабильностью при хранении. Эффективность такого подхода иллюстрируется многочисленными примерами создания VLP для борьбы с такими инфекционными заболеваниями, как малярия, бешенство, вирусные гепатиты В, С и Е папилломавирусная инфекция (рак шейки матки), СПИД и т.д.

    Одним из наиболее эффективных носителей антигенных детерминант является нуклеокапсидный белок вируса гепатита В человека, а также близкородственные вирусы животных, в дальнейшем коллективно именуемые ВГБ. Мономеры этого белка, состоящие из 183-185 аминокислот, в инфицированных клетках собираются в стабильные агрегаты (вирусоподобные частицы), называемые НВс-частицы. Образуются два типа частиц — частицы диаметром около 30 нм, состоящие из 180 мономеров, и в большем количестве частицы диаметром 34 нм, состоящие из 240 субъединиц.

    Известно, что НВс-частицы могут быть использованы в качестве высокоиммуногенного носителя чужеродных пептидов, стимулирующего Т-клеточный иммунный ответ. Два района НВс могут быть использованы для презентации чужеродных пептидов на поверхности НВс-частиц, — N — конец белка и так называемая иммунодоминантная петля, расположенная между 75 и 85 аминокислотными остатками белка. Было показано, что С — концевая аргинин-богатая область белка (150-183 аминокислотные остатки) может быть удалена без нарушения самосборки частиц, более того, в отличие от образованных полноразмерным белком, такие частицы при сборке не включают нуклеиновые кислоты клетки-хозяина.

    Противогриппозные вакцины на основе рекомбинантных НВс-частиц

    Использование рекомбинантных НВс-частиц для получения противогриппозных вакцин описано в работе [Neirynck et al., (1999) Nature Med., 5(10):1157-1163] и последующих работах этой группы. Их авторами получена серия рекомбинантных НВс-частиц, содержащих внеклеточный домен М2 (М2Е) белка вируса гриппа человека (М2еНВс частицы) и показана их высокая иммуногенность и протективность в отношении инфекции человеческим вирусом гриппа в опытах на лабораторных животных. В этих работах была использована М2Е последовательность S L L T E V E T P I R N E W G C R C N D S S D, присутствующая в практически неизменном виде во всех человеческих штаммах вируса, начиная с изолированного в 1933 г. штамма A/WSN/33.

    Белок М2 вирусов гриппа типа А принципиально важен для конструирования универсальных вакцин в связи с рядом недооцененных его свойств:

    1. Локализация и экспонирование на поверхности вириона.

    2. Критическая важность в процессах фьюжина и почкования (ранняя и поздняя стадии инфекции).

    3. Высокий консерватизм среди всех подтипов вируса вируса гриппа А.

    Выбор высококонсервативного антигена предусматривал индукцию антител, способных к подавлению репродукции к большинству подтипов А вирусов гриппа. Такая вакцина получила название «универсальной» — предполагающей защиту фактически от всех вирусов гриппа типа А.

    У вирусов гриппа животного происхождения последовательность М2Е отличается от приведенной выше. Например, последовательности S L L T E V E T P T R N G W E C K C S D S S D и S L L T E V E T P T R N E W E C R C S D S S D встречаются в различных штаммах «птичьего» гриппа (A/Duck/ Potsdam 1402-6/198 6 и A/Chicken/Kurgan/05/2005 соответственно), а М2е вируса «свиного» гриппа A/California/04/2009(h2N1) имеет последовательность S L L T E V E T P T R S E W E C R C S D S S D (подчеркнуты отличия от консенсусной последовательности «человеческих» штаммов вируса гриппа). Разработка рекомбинантных противогриппозных вакцин на основе НВс частиц, представляющих на своей поверхности М2Е пептиды вирусов гриппа животного происхождения, описана нами ранее [Равин Н.В., Киселев О.И., Скрябин К.Г. (2009) Универсальная вакцина против вируса гриппа птиц. Патент РФ № 2358981 от 20.06.2009 г.] и [Котляров Р.Ю., Куприянов В.В., Мигунов А.И., Степанова Л.А., Цыбалова Л.М., Киселев О.И., Равин Н.В., Скрябин К.Г. (2010). Разработка рекомбинантной вакцины против гриппа A(h2N1) 2009 на основе вирусоподобных наночастиц — носителей внеклеточного домена М2 белка. Acta Naturae, т.2 № 2(5), с.75-80]. Во всех описанных работах препараты вакцинных белков и рекомбинантных НВс-частиц, несущих М2е пептиды, были получены в клетках бактерий Escherichia coli.

    Методы продукции рекомбинантных белков

    Одним из наиболее ярких и убедительных достижений современной биотехнологии стало создание и бурное развитие в последние десятилетия новой области мировой экономики — биофармацевтической промышленности и промышленности биоматериалов, направленной на производство принципиально нового класса лекарств — рекомбинантных белков медицинского назначения. Различные вакцинные белки, интерфероны, эритпропоэтины, факторы роста, антитела, доступные ранее лишь в аналитических количествах, входят теперь в перечень жизненно-важных медицинских препаратов, производятся в объемах до нескольких тонн в год и прочно вошли в повседневную практику современной медицины, пищевой и фармацевтической промышленности. В подавляющем большинстве случаев источником получения этих продуктов служат клетки бактерий, животных или дрожжей.

    Использование растений как «биофабрик» для продукции чужеродных белков имеет ряд преимуществ по сравнению с клетками бактерий, дрожжей и млекопитающих:

    (1) Наработка целевых белков в растениях не требует применения дорогостоящей аппаратуры (ферментеры), культуральных сред и системы стерильности Для роста растений требуются только почва, вода и солнце, поэтому стоимость их выращивания несравнимо ниже стоимости культивирования клеток бактерий, дрожжей или животных. Вследствие этого стоимость белков, получаемых в растениях, уже сегодня в 10-30 раз ниже стоимости аналогичных белков, получаемых из бактерий [Giddings, G., Allison, G., Brooks, D., Carter, A (2000) Transgenic plants as factories for biopharmaceuticals. Nat. Biotechnol. 18 (11), 1151-1155].

    (2) Клетки растений биологически безопасны, поскольку растения и человек не имеют общих патогенов. Поэтому получаемые в растениях продукты не содержат опасных для человека вирусов и прионов.

    (3) В отличие от бактерий и дрожжей, растения и животные имеют сходную систему посттрансляционных модификаций белков. Поэтому в растительных клетках могут быть получены те белки человека и животных, которые не могут быть корректно экспрессированы в микроорганизмах.

    Применяемые в настоящее время технологии экспрессии рекомбинантных белков в растениях, как правило, предполагают получение трансгенного растения — продуцента. Уже сегодня имеется ряд примеров коммерчески успешного производства белков в растениях таким способом. Например, получаемые в трансгенных растениях кукурузы трипсин, авидин и глюкуронидаза уже сейчас производятся и продаются фирмой Сигма-Алдрич. Близки к выходу на рынок апротинин (ProdiGene), коллаген (ProdiGene, Medicago, Meristem Therapeautics), липаза (Meristem Therapeautics), лактоферрин (Ventria, Meristem Therapeutics), лизоцим (Ventria), вакцина против вируса гастроэнтерита TGEV (ProdiGene), моноклональные антитела против кариеса и вируса герпеса (Planet Biotechnology, Epicyte Pharmaceutical). Первая полученная в растениях вакцина от болезни Ньюкасла, разработанная компанией Dow Agroscience успешно прошла регистрацию в США в 2006 году, более 20 полученных в растениях биофармацевтиков в настоящее время находятся на различных стадиях клинических испытаний (http://www.molecularfarmmg.com/news2.html).

    Следует отметить, что получение трансгенных растений не является оптимальным способом создания растительных «биофабрик», так как уровень продукции целевых белков трансгенными растениями, как правило, весьма низок (около 0,1% общего белка). Низкий уровень экспрессии определяет высокую стоимость очистки продукта и, в конечном итоге, конкурентоспособность растительной системы экспрессии. Кроме того, культивирование трансгенных растений связано с рядом формальных ограничений.

    Повышение экономической эффективности использования растений в качестве «биофабрик» — продуцентов белков — требует разработки новых технологий продукции в нетрансгенных растениях на высоком уровне целевых белков. Такие технологии позволят получать в растениях недорогие и безопасные белки и могут стать конкурентоспособной альтернативой традиционным методам, основанным на использовании бактерий, дрожжей или клеток животных.

    Альтернативой трансгенным растениям как продуцентам рекомбинантных белков могут являться системы экспрессии, основанной на рекомбинантных вирусах растений (вирусы-векторы). Многие растительные вирусы, например вирус табачной мозаики и X-вирус картофеля, при заражении растения размножаются в больших количествах, а уровень продукции собственных белков вируса достигает 70% белков растительной клетки. Смысл этого метода состоит в интеграции гена, кодирующего необходимый чужеродный белок, в геном вируса и заражении модифицированным вирусом растительных клеток. При инфекции синтезируются не только собственные белки вируса, но и целевой белок, ген которого был специально вставлен в геном вируса. Уровень продукции рекомбинантного белка в этом случае может составлять до 20% общего белка [Marillonnet, S., Thoeringer, С., Kandzia, R., Klimyuk, V., Gleba, Y. (2005) Systemic Agrobacterium tumefaciens-mediated transfection of viral replicons for efficient transient expression in plants. Nat. Biotechnol., 23, 718-723], что соответствует 1 грамму белка на 1 килограмм растительной биомассы, что в десятки-сотни раз выше уровней продукции, обычно достигаемых в трансгенных растениях.

    До настоящего времени для получения М2еНВс частиц использовали только системы экспрессии в клетках бактерий Е. coli. Нам не известны опубликованные данные по продукции в растениях (как в трансгенных растениях, так и с помощью рекомбинантных вирусов-векторов) рекомбинантных НВс-частиц, несущих М2е пептиды. Поэтому актуальным остается создание альтернативных методов продукции этих перспективных противогриппозных вакцинных препаратов, одним из наиболее перспективных из которых являются растительные системы экспрессии.

    Раскрытие изобретения

    В настоящем изобретении ставилась задача создания вирусного вектора, который может обеспечивать продукцию в растениях рекомбинантных НВс-частиц, содержащих внеклеточный домен М2 белка вируса гриппа штамма A/Duck/Potsdam/4024/26 (далее -М2ерНВс-частицы), и соответствующей системы экспрессии этого продукта в клетках растений Nicotiana benthamiana.

    Фактически задача была решена путем:

    а) дизайна и синтеза оптимизированного для экспрессии в растениях гена, кодирующего гибридный белок, включающий М2Е пептид и НВс антиген вируса гепатита В.

    б) клонирования синтезированного гена в вирусе-векторе на основе генома Х вируса картофеля,

    в) разработки протоколов инфицирования рекомбинантным вирусом-вектором растений Nicotiana benthamiana и последующей продукции в растениях рекомбинантного белка М2ерНВс.

    Первый аспект настоящего изобретения связан с дизайном гибридного белка М2ерНВс, включающего М2Е пептид вируса гриппа птиц штамма A/Duck/Potsdam/4024/26 и НВс антиген вируса гепатита В, и конструированием синтетического гена, кодирующего этот белок.

    Вторым аспектом изобретения является получение экспрессионного вируса-вектора, обеспечивающего продукцию в растениях белка М2ерНВс.Для этого упомянутый выше синтетический ген был клонирован в вирусный вектор pA7248amvT.

    Соответственно, третий аспект изобретения относится к оптимизации условий инфицирования растений Nicotiana benthamiana рекомбинантным вирусом-вектором и последующей продукции в растениях рекомбинантного белка М2еНВс.

    Четвертый аспект изобретения связан с подтверждением факта продукции в растениях белка М2ерНВс в результате Вестерн-блот анализа белковых препаратов, выделенных из растений-продуцентов. При этом было показано, что рекомбинантный белок М2ерНВс действительно синтезируются в листьях растений-продуцентов. С помощью электронно-микроскопического анализа показано, что этот белок спонтанно собирается в вирусоподобные частицы размером около 30 нанометров, сходные с М2ерНВс-частицами, образуемыми этим белком при экспрессии в клетках бактерий Escherichia coli.

    Краткое описание чертежей

    Фиг.1 — Структура гибридного белка М2ерНВс, включающего последовательности М2Е пептида вируса гриппа штамма A/Duck/Potsdam/4024/26 и НВс антигена вируса гепатита В.

    Приведена аминокислотная последовательность М2ерНВс белка. Последовательность М2е пептида выделена серым.

    Фиг.2 — Структура вирусного вектора pA7248amvM2epHBc, обеспечивающего продукцию белка М2ерНВс в растениях.

    Показаны структуры Т-ДНК областей вирусного вектора pA7248amvM2epHBc и исходного вектора pA7248amvT, участки за пределами области Т-ДНК показаны пунктирной линией. Границы Т-ДНК (бордеры, «В») отмечены жирными вертикальными линиями. 35S, — промотор, 35S-T — терминатор 35S РНК вируса мозаики цветной капусты. RDRP-ген полимеразы, Sgp1 — первый промотор субгеномной РНК Х вируса картофеля. Tet, — ген устойчивости к тетрациклину. AMV, — ДНК копия лидерной последовательности РНК вируса мозаики люцерны.

    Фиг.3 — Вестерн-блот анализ белковых препаратов, выделенных из растений-продуцентов М2ерНВс.Детекция моноклональными антителами на М2е.

    На гель нанесены белковые препараты:

    1. Маркер молекулярного веса, размеры полос указаны в килодальтонах.

    2. Растворимые белки из неинокулированных листьев N. benthamiana (контроль).

    3. Растворимые белки из листьев N. benthamiana, инокулированных вирусом-вектором pA7248amvM2epHBc

    Фиг.4 — Результаты электронно-микроскопического анализа М2ерНВс частиц, выделенных из растений-продуцентов.

    Осуществление изобретения.

    Пример 1. Рекомбинантная белковая молекула М2ерНВс и кодирующая ее рекомбинантная нуклеиновая кислота.

    Для получения иммуногенных вирусоподобных частиц использовали рекомбинантный белок, включающий внеклеточный домен М2 белка (М2Е) вируса гриппа штамма A/Duck/Potsdam/4024/26 и НВс антиген вируса гепатита В. Рекомбинантная белковая молекула, М2ерНВс включала последовательно следующие элементы: N-концевой метионин, последовательность аминокислот, соответствующую М2Е пептиду из штамма A/Duck/Potsdam/4024/26 вируса гриппа, аминокислотную последовательность НВс [Bichko, V., Pushko, P., Dreilina, D., Pumpen, P. and Gren, E. (1985) FEBS Lett. 185 (1), 208-212]. Для улучшения растворимости белка два цистеина в положениях 17 и 19 М2Е пептида, наличие которых может способствовать образованию дисульфидных связей, заменяли на серины, что не влияет на иммунологические характеристики М2Е. Аминокислотная последовательность рекомбинантной белковой молекулы М2ерНВс представлена в SEQ ID NO:1 и показана на Фиг.1.

    Нуклеотидная последовательность синтетического гена, кодирующего М2ерНВс, оптимизирована для экспрессии в растениях и содержит последовательности сайтов рестрикции AscI и SmaI для клонирования в вирусный вектор pA7248amvTet. Последовательность гена М2еНВс была синтезирована in vitro. Нуклеотидная последовательность искусственного гена М2ерНВс представлена в SEQ ID NO:2.

    Пример 2. Конструирование экспрессионного вируса-вектора, обеспечивающего продукцию в растениях рекомбинантного белка М2ерНВс.

    В качестве основы для создания вектора был использован описанный в работе [Марданова Е.С., Котляров Р. Ю., Равин Н.В. (2009) Повышение эффективности продукции рекомбинантных белков в растениях за счет оптимизации трансляции РНК вируса-вектора. Молекулярная биология, т.43, № 3, с.568-571] вирусный вектор pA7248amvT, основанный на геноме Х-вируса картофеля штамма UK3 [нуклеотидная последовательность генома этого вируса приведена в GenBank под номером М95516]. Этот вектор включает 5′-нетранслирумый участок генома ХВК, ген полимеоазы. первый промотор субгеномной РНК, трансляционный энхансер — нуклеотидную последовательность, соответствующую лидерной последовательности РНК вируса мозаики люцерны (AMV), ген устойчивости к тетрациклину (Tet), фланкированный уникальными сайтами рестрикции AscI и SmaI, последние 60 нуклеотидов гена белка оболочки и 3′-нетранслируемый участок генома Х-вируса картофеля. Вся эта конструкция помещена между 35S промотором и 35S терминатором и клонирована в бинарном векторе pBIN19. При доставке в клетки с помощью агроинфильтрации листьев происходит заражение большей части клеток листа в инфицированной области, репликация вирусного вектора в отдельных клетках и синтез продукта на высоком уровне.

    Для создания вирусного вектора-продуцента М2ерНВс, ДНК вектора pA7248amvT обрабатывали рестриктазами AscI и SmaI и дотировали с обработанным этими рестриктазами фрагментом ДНК, содержащим искусственный ген М2ерНВс.Полученный рекомбинантные вектор, содержащий ген М2ерНВс на месте гена Tet, который был отобран по результатам рестрикционного анализа, обозначали pA7248amv М2ерНВс.

    Структура вирусного вектора pA7248amv М2ерНВс, обеспечивающего продукцию в растениях рекомбинантного белка М2ерНВс, показана на Фиг.2.

    Пример 3. Инфицирование растений Nicotiana benthamiana рекомбинантным вирусом-вектором и продукция в растениях белка М2ерНВс.

    Для экспериментов по экспрессии белка М2ерНВс в растениях N. benthamiana вирусный вектор pA7248amvM2epHBc вводили в штамм Agrobaterizim tumefaciens GV3101, рекомбинантные агробактерии были использованы для инфильтрации листьев N. benthamiana. Агробактерии, содержащие рекомбинантный бинарный вектор, выращивали в течение 12 ч на шейкере при 30°С. Клетки (1,5 мл) осаждали центрифугированием (4000g, 5 мин), осадок ресуспендировали в 1,5 мл буфера, содержащего 10 мМ MES (рН 5.5) и 10 мМ MgCl2, оптическую плотность доводили до OD 600=0,2. Листья растений N. benthamiana инъецировали суспензией агробактерии при помощи шприца без иглы. Инфильтрированные листья оставляли на растущих растениях.

    Известно, что одним из основных факторов, ограничивающих вирусную инфекцию, в частности экспрессию целевых белков в вирусных системах экспрессии, является развитие посттранскипционного умолкания генов (PTGS), активированного двунитевыми репликативными формами вирусных РНК [Marillonnet, S., Thoeringer, С., Kandzia, R., Klimyuk, V., Gleba, Y. (2005) Systemic Agrobacterium tumefaciens-mediated transfection of viral replicons for efficient transient expression in plants. Nat. Biotechnol., 23, 718-723]. Для предотвращения этого явления одновременно с агробактериями, содержащими вирус-вектор pA7248amv М2ерНВс, в листья растений инфильтрировали агробактерии, содержащие вектор-продуцент белка Р19 вируса кустистой карликовости томатов, известного суппрессора посттранскипционного умолкания генов.

    После инфильтрации листьев N. benthamiana агробактериями с вирусом-вектором происходит заражение большей части клеток листа в инфицированной области, перенос Т-ДНК в ядро, транскрипция копии вирусной РНК с 35S промотора [Комарова Т.В., Скулачев М.В., Зверева А.С., Шварц A.M., Дорохов Ю.Л., Атабеков И.Г. (2006) Новый вирус-вектор для эффективной продукции целевых белков в растениях. Биохимия, 71(8), 1043-1049]. На последующей стадии происходит репликация вирусного вектора и синтез продукта на высоком уровне. Максимум синтеза продукта достигается на 6-10 сутки после инфильтрации.

    Пример 4. Детекция продуцированного в растениях белка М2ерНВс методом Вестерн-блот анализа.

    Наличие целевого белка в листьях растений-продуцентов регистрировали с помощью Вестерн-блот анализа. На 6-10 день после заражения фрагмент листа растирали в буфере 0.4М сахароза, 50 мМ Трис рН 8.0, 10 mM KCI, 5mM MgCl2, 10% глицерин, 10 мМ -меркаптотанол. Полученный экстракт центрифугировали 10 минут при 14000 g, супернатант анализировали методом Вестерн-блота с использованием антител, полученных к М2е пептиду. Результаты анализа представлены на Фиг.3.

    Как видно из результатов, представленных на Фиг.3, в клетках растения N. benthamiana, инфильтрированных вирусом-вектором pA7248amvM2epHBc, экспрессируется белок М2ерНВс, причем это белок является растворимым. Выход целевого продукта составляет 1-2% от растворимой фракции белков.

    Пример 5. Образование продуцированным в растениях белком М2ерНВс вирусоподобных частиц.

    На следующем этапе вирусоподобные частицы, образованные М2ерНВс, очищали ранее разработанным нами методом осаждения белков сульфатом аммония [Равин Н.В., Киселев О.И., Скрябин К.Г. (2009) Универсальная вакцина против вируса гриппа птиц. Патент РФ № 2358981 от 20.06.2009 г.] и ультрацентрифугированием в градиенте сахарозы и хлористого цезия. Как видно из результатов, представленных на Фиг.4, экспрессированный в клетках растения гибридный белок М2ерНВс образует вирусоподобные наноразмерные частицы.

    ЛИТЕРАТУРА

    1. Giddings, G., Allison, G., Brooks, D., Carter, A. (2000) Transgenic plants as factories for biopharmaceuticals. Nat. Biotechnol. 18 (11), 1151-1155.

    2. MacDiarmid, R. (2005) RNA silencing in productive virus infections. Annu. Rev. Phytopathol., 43, 523-544

    3. Marillonnet, S., Thoeringer, C, Kandzia, R., Klimyuk, V., Gleba, Y. (2005) Systemic Agrobacterium tumefaciens-mediated transfection of viral replicons for efficient transient expression in plants. Nat. Biotechnol. , 23, 718-723.

    4. Neirynck S., Deroo Т., Saelens X., Vanlandschoot P., Jou W.M., Fiers W. (1999) A universal influenza A vaccine based on the extracellular domain of the M2 protein. Nat Med, 5, 1157-1163.

    5. Nicholson К., Webster R., Hay A. (1998) Textbook of Influenza. Oxford, Blackwell Science.

    6. Webster R., Bean W., Gorman O., Chambers Т., Kawaoka Y. (1992) Microbiol. Rev., 56, 152-179.

    7. Комарова Т.В., Скулачев М.В., Зверева А.С., Шварц A.M., Дорохов Ю.Л., Атабеков И.Г. (2006) Новый вирус-вектор для эффективной продукции целевых белков в растениях. Биохимия, 71(8), 1043-1049.

    8. Котляров Р.Ю., Куприянов В.В., Мигунов А.И., Степанова Л.А., Цыбалова Л.М., Киселев О.И., Равин Н.В., Скрябин К.Г. (2010) Разработка рекомбинантной вакцины против гриппа A(h2N1) 2009 на основе вирусоподобных наночастиц — носителей внеклеточного домена M2 белка. Acta Naturae, 2(5), 75-80.

    9. Марданова B.C., Котляров Р.Ю., Равин Н.В. (2009) Повышение эффективности продукции рекомбинантных белков в растениях за счет оптимизации трансляции РНК вируса-вектора. Молекулярная биология, 43(3), 568-571.

    10. Равин Н.В., Киселев О.И., Скрябин К.Г. (2009) Универсальная вакцина против вируса гриппа птиц. Патент РФ № 2358981 от 20.06.2009 г.

    Аппарат вектор в стоматологии — стоимость ультразвуковой профессиональной чистки зубов и лечения заболеваний десен (парадонтоз, пародонтит) аппаратом вектор

     

    Новый Vector в парадонтологии

    Пришло время малоинвазивного, суперделикатного и максимально щадящего лечения пародонтита. Аппарат VECTOR – альтернатива традиционной хирургии.

    Еще вчера уменьшить боль и отечность дёсен с большим трудом удавалось за 5-7 дней. Сегодня, благодаря аппарату VECTOR, пациенты избавляются от страданий максимум за 2 посещения.

    Что имеем – не храним, потерявши – плачем

    По статистике Стоматологической ассоциации России, около 85% населения нашей страны страдает заболеваниями пародонта – тканей, которые окружают зубы, и 70% из них прерывают начатое лечение.

    Отказ от лечения или не вовремя начатое лечение пародонтита приводит к самым серьезным последствиям:

    • Увеличивается риск возникновения заболеваний желудочно-кишечного тракта, инфаркта и инсульта.
    • Происходит перемещение зубов, даже их потеря, и как результат – эстетические изменения внешности: появляются морщинки, лицо становится менее пропорциональным. Более того, меняется цвет лица, структура кожи. Вы сразу будете выглядеть на несколько лет старше.
    • Будущие мамы, болеющие пародонтитом, подвержены различным осложнениям во время беременности.

    Почему же тогда более половины россиян отказываются продолжать лечение?

    В основном останавливает болезненность процедуры и, конечно, незнание тех страшных последствий, которые неизбежны при прогрессировании заболевания.

    Вперед – к здоровому будущему

    Революционная разработка немецкой компании Durr Dental аппарат VECTOR (аппарат «Вектор») обеспечивает как профилактику, так и лечение пародонтита.

    Во время процедуры на аппарат подается специальная смесь с мельчайшими частицами активного вещества, содержащего фтор и кальций. Вибрация создает ультразвуковое поле, частицы вещества в нем упорядоченно колеблются, тщательно удаляют микробные биопленки и бактериальные отложения из зубодесневого кармана, полируют эмаль.

    Преимущества аппарата Vector

    • Без боли…
      В отличие от традиционного метода, ультразвуковые вибрации позволяют разрушать зубные отложения бесконтактно. Это делает процедуру практически нетравматичной. Период заживления после лечения проходит быстро, без отеков и болезненных ощущений.
    • …и страха
      Поскольку процедура не требует анестезии, пациенты не испытывают психологического дискомфорта и страха.
    • Чище и глубже
      Обычные ультразвуковые аппараты производят чистку на глубине до 5 мм, VECTOR – до 11 мм. Это зачастую помогает избежать хирургического вмешательства. Гибкие инструменты позволяют работать со сложными поверхностями – например, с изгибами корней зубов. Важно! Лечение десен аппаратом VECTOR – единственная альтернатива для гигиены металло-керамических протезов и имплантатов.
    • Эстетика
      Ткани пародонта во время процедуры получают благоприятные условия для восстановления после поражения местной инфекцией. Десны становятся плотными, розовыми, прекращается их кровоточивость и гноетечение из десневых карманов. Использование данного аппарата позволяет добиться лучшего прикрепления десны к зубу и как, следствие, практически исключает вероятность возникновения рецессии десны.
    • Кто против?
      VECTOR рекомендован всем, включая беременных женщин и пожилых людей. Единственное ограничение – данный метод не подходит пациентам с установленным кардиостимулятором.
    • И еще…
      … чудо VECTOR может поставить микропломбы и запечатать микротрещинки в эмали зуба!

    «VECTOR» в современной стоматологии

    • Профессиональная гигиена
      Высокие технологичность и мощность аппарата VECTOR позволяют справляться с самыми стойкими зубными отложениями. Новинка соответствует высочайшим стандартам профессиональной чистки зубов: одновременная подача полировочной суспензии Vector Fluid Polish позволяет сберечь и отполировать чувствительные поверхности зубов.
    • Пародонтологическое лечение
      Зубной камень, микробная биоплёнка и бактерии удаляются тонкими инструментами с поверхностей корней до самого дна пародонтального кармана даже в анатомически сложных областях, не повреждая мягкие ткани. Поверхности корней очищаются и полируются с помощью полировальной суспензии Vector Fluid Polish, содержащей частицы гидроксилапатита. Корень деликатно очищается, а не «выскабливается», как раньше.
    • Профилактика пародонтальных проблем
      Профилактические процедуры являются частью пародонтологического лечения. Регулярная проверка пародонтальных карманов на предмет их повторного инфицирования является важной частью поддерживающей терапии. VECTOR делает эти манипуляции абсолютно простыми и щадящими.
    • Лечение периимплантита
      Воспаление тканей вокруг имплантата является одной из основных проблем имплантологии. VECTOR наилучшим образом подходит для удаления налёта, бактерий и микробной биоплёнки с поверхности имплантатов: не повреждает в процессе обработки чувствительные материалы и супраконструкции.
    • Микроинвазивное препарирование
      Добавление абразивной суспензии Vector Fluid abrasive позволяет проводить выборочное микроинвазивное препарирование – лечение начального кариеса без бормашины. Оно проводится без воздействия высоких температур и безвредно для пульпы. При этом не ослабляются эмалевые призмы, что обеспечивает высокое качество краевого прилегания последующих реставраций.

    Уникальный аппарат VECTOR – альтернатива традиционной хирургии – способствует быстрому, безболезненному и результативному лечению пародонтита. Помните: количество зубов, потерянных пациентами вследствие пародонтита, обратно пропорционально частоте повторных визитов к стоматологу.

    Чтобы сохранить зубы, позаботьтесь о здоровье десен: запишитесь на консультацию к врачу-пародонтологу.

    Официальный сайт производителя

    Задать вопрос

    Задать вопрос специалисту

    Обратный звонок

    Мы перезвоним в удобное для вас время.

    Записаться на прием

    Результаты работы

    Отзывы

    Отзывы о сети стоматологических клиник Вероника

    Сопутствующие услуги

    В лесах Сочи зацвел редкий цветок кандык кавказский

    Фото: пресс-служба нацпарка Сочи

    Фото: пресс-служба нацпарка Сочи

    Краснокнижное растение можно встретить только на Кавказе.

    Кандык кавказский зацвел в Сочинском национальном парке. Это уязвимый кавказско-переднеазиатский вид на северо-западной границе ареала. Он включен в Красные книги РФ, Краснодарского и Ставропольского краев, Карачаево-Черкесской Республики, Адыгеи и Южной Осетии.

    Кандыки цветут во второй половине марта в предгорьях и в апреле – начале мая на субальпийских лугах. Каждый цветок держится до 8 дней. Некоторые виды и сорта во время цветения меняют окраску. Вечером и в пасмурную погоду листочки околоцветника закрываются, чтобы защитить пыльцу от намокания. Нередко на листьях присутствует мраморный рисунок из зеленых и пурпурных пятен.

    Цветок у кандыка кавказского чаще всего один – белый, изредка розоватый. В предгорьях Сочинского нацпарка он цветет сразу после подснежников и цикламенов.

    В пресс-службе нацпарка предупредили, что не стоит пытаться собрать букет кандыков, так как то запрещено. Кроме того, растение не стоит в воде и быстро увядает.

    Как сообщали ранее «Кубанские новости», в Сочинском национальном парке распустились первые цветы сакуры. Специалисты зафиксировали одиночные цветущие экземпляры на сакуре-хиган и сакуре Ланезза.,

    векторных растений скачать бесплатно, 1650 векторных файлов

    ВекторФотоPhotoshopPSDIconsFont Зарегистрироваться Авторизоваться Свободный вектор
    • Векторное абстрактное
    • Вектор животных
    • Векторная архитектура
    • Векторный фон
    • Векторный баннер
    • Векторный день рождения
    • Вектор Бизнес
    • Векторный календарь
    • Векторный автомобиль
    • Векторная карта
    • Векторный мультфильм
    • Вектор Рождество
    • Крышка Vector
    • Вектор Пасха
    • Векторный фестиваль
    • Цветочный вектор
    • Векторный цветок
    • Векторный шрифт
    • Vector Food
    • Рамы и бордюры
    • Вектор Хэллоуин
    • Вектор в форме сердца
    • Векторные иконки
    • Векторная этикетка
    • Vector Life
    • Векторный логотип
    • Векторные карты
    • Векторная музыка
    • Векторный орнамент
    • Векторный узор
    • Вектор Люди
    • Векторный завод
    • Векторная лента
    • Векторный пейзаж
    • Векторные силуэты
    • Вектор Спорт
    • Векторный трафик
    • Vector Travel
    • Векторный веб-дизайн
    • Другой вектор
    Бесплатное фото
    • Абстракция
    • Животные
    • Фоны
    • Красота
    • Здания
    • Бизнес
    • Рождество
    • Строительство
    • Образование
    • Окружающая среда
    • Сельское хозяйство
    • Цветы
    • Еда
    • Здоровье
    • Праздник
    • Интерьеры
    • Интернет
    • Дети
    • Музыкальный
    • Природа
    • Объектов
    • Люди
    • Растения
    • Космос
    • Спорт
    • Технологии
    • Текстура
    • Транспорт
    • Путешествие
    • Транспортные средства
    • Свадьба
    • Другое фото
    Фотошоп
    • Экшен Photoshop
    • Кисти для Photoshop
    • Градиенты Photoshop
    • Узоры для Photoshop
    • Фигуры Photoshop
    • Стили Photoshop
    • Текстуры Photoshop
    Бесплатные иконки
    • Иконки животных
    • Значки приложений
    • Иконы искусства
    • Значки значков
    • Иконки для бизнеса
    • Иконки автомобилей
    • Мультфильм Иконки
    • Компьютерные иконки
    • Смайлики Иконки
    • Еда Иконки
    • Праздничные иконки
    • Иконки Жизни
    • Музыкальные иконки
    • Люди Иконы
    • Завод Иконки
    • Спортивные иконки
    • Системные значки
    • Веб-иконки
    • Прочие значки
    Бесплатная PSD
    • 3D PSD файл
    • Фоны PSD
    • Кнопки PSD
    • Мода PSD
    • Цветок PSD
    • Еда PSD файл
    • Праздник PSD
    • Иконки PSD
    • Life PSD File
    • Природа PSD
    • Люди PSD
    • PSD шаблоны
    • Веб-элементы PSD
    • Другой PSD
    Шрифт
    • Каллиграфический шрифт
    • Мультяшный шрифт
    • Fire-Ice шрифт
    • Шрифт Graffiti
    • Рукописный шрифт
    • Ретро шрифт
    • Другой шрифт
    1 2 3 … 66 »
    Около
    Политика конфиденциальности
    DMCA
    Свяжитесь с нами
    Pinterest
    Твиттер
    Facebook
    Tumblr
    Бесплатный Шаблон PowerPoint
    Реклама
    Условия использования
    RSS

    Авторское право и копия 2020 FreeDesignFile.Все права защищены

    растений PNG, вектор, PSD и клипарт с прозрачным фоном для бесплатной загрузки

  • завод

    1200 * 1200

  • горшечные растения

    2000 * 2000

  • горшок для растений

    3000 * 3000

  • рисованной шумовой иллюстрации элемент дизайна листьев зеленого растения в горшке

    2000 * 2000

  • рисованной иллюстрации шума зеленый элемент дизайна листьев растения в горшке

    2000 * 2000

  • квадратный черный цветочный горшок зеленое растение

    3000 * 2848

  • комнатные растения горшечные растения png скачать бесплатно

    1200 * 1200

  • растение рисованной иллюстрации растений зеленый эвкалипт

    2448 * 3264

  • северное настоящее украшение зеленое растение

    5400 * 7200

    9 зеленое тропическое растение бордюр из пальмовых листьев

    1200 * 1200

  • маленький зеленый f реш тропическое растение пальма прямоугольная рамка

    1200 * 1200

  • золотая линия цветочное растение

    1200 * 1200

  • NEW

    голубое небо растение летом плакат

    1415 * 2000

  • ручная роспись зеленых растений плавающие листья

    2000 * 2000

  • границы текстуры рисованные растения цветы и

    2000 * 2000

  • осенние и кленовые листья нарисованные растения простые

    2000 * 2000

  • растение зеленый лист декоративный элемент

    1024 * 1369

  • белое цветочное растение роза

    1200 * 1200

  • квадратный керамический цветочный горшок зеленое растение

    3000 * 3000

  • золотая линия рисунок цветочное растение

    1200 * 1200

  • НОВИНКА

    летнее растение летом плакат

    1415 * 2000

  • зеленый лист синие листья ват эрколор листья акварельное растение

    2088 * 2820

  • коммерческая ручная роспись акварель ветер зеленый лист растение пальма подорожник тропическая растительность

    1024 * 1369

  • зеленый лето тропический растительный материал

    1200 * 1200

  • зеленое растение банан банановый лист растение

    2000 * 2142

  • рисованной ветер зеленое растение низкие элементы кустарника

    1024 * 1369

  • акварель цветы цветочное растение

    2000 * 2000

  • зеленые листья е цветочный горшок красивый горшок растение рисованной иллюстрации в горшке

    2000 * 2451

  • золотое рисовое растение

    1200 * 1200

  • NEW

    летний арбуз летом плакат

    1415 * 2000

  • свежий ручной росписью натуральный зеленый бордюрные элементы растений

    1200 * 1200

  • малый fre ш завод границы

    1200 * 1200

  • простой рисованной ветер зеленое растение бамбуковый элемент

    1024 * 1369

  • листья растений черного золота ручная роспись границы золотой лист

    1200 * 1200

  • рисованные растения растение чернильное растение зеленый лист

    2000 * 2000

  • лес тропические листья и лист растение пальмовая рамка

    1667 * 1667

  • цветочные растения

    1200 * 1200

  • NEW

    летнее голубое небо растение в летний плакат

    1415 * 2000

  • зеленые листья вектор значок дизайн на белом фоне различные формы зеленых листьев деревьев и растений элементы для эко и био логотипов

    1667 * 1667

  • завод границы текстуры листья цветы тропические растения

    2000 * 2000

  • границы текстуры рисованные растения и

    2000 * 2000

  • границы рисованной растения цветочные

    1024 * 1369

  • зеленое растение бонсай

    2000 * 2000

  • акварель цветочные границы рисованной цветы листья элементы растений

    1024 * 1369

  • книжный шкаф канцелярские товары горшечное растение

    2000 * 2000

  • чернила цветок лотоса лист лотоса чернила акварель завод

    2480 * 3508

  • реалистичные листва зеленое растение алоэ вера вектор

    5000 * 5000

  • рисованной тропические растения листья зеленые элементы 9036

    1024 * 1369

  • цветочные бордюры тропических растений летом

    1200 * 1200

  • mbe значок растения четырехлистный клевер милый

    2000 * 2000

  • ручная роспись зеленых золотых ветвей листьев растений

    1200 * 1200

  • рамка ручная роспись акварель бордюр растительный бордюр красочная вода lor border

    2000 * 2000

  • природа пейзаж векторная иллюстрация поле векторная иллюстрация с зеленой травой и некоторыми растениями

    4167 * 4167

  • посадки деревья

    1200 * 1981

  • цветы растение зеленый лист одуванчик

    2880 * 1620

  • pCambia1304 Вектор экспрессии растений (ab275550)

    Обзор

    • Название продукта

      pCambia1304 Вектор экспрессии растений

    • Общие примечания

      Вектор содержит ген устойчивости к канамицину для бактериальной селекции, ген устойчивости к гигромицину B для селекции растений и репортерные гены слияния mgfp5: gusA .

      Вектор pCambia1304 предлагает:
      Высокое количество копий в E.coli для высоких выходов ДНК
      репликон pVS1 для высокой стабильности в Agrobacterium
      Малый размер
      Сайты рестрикции, разработанные для модульных модификаций плазмид и небольшие, но адекватные полилинкеры для введения интересующая вас ДНК
      Селекция бактерий с канамицином
      Селекция растений с гигромицином B
      Простые способы конструирования трансляционных слияний с репортерными генами mgfp5-gusA

      Селекционные гены растений в векторах pCambia управляются двойной энхансерной версией промотора CaMV 35 S и заканчиваются сигналом polyA CaMV 35 S.Репортерные гены содержат гексагистидиновую метку на С-конце, чтобы обеспечить простую очистку на смолах для аффинной хроматографии с иммобилизованным металлом.

      Этот вектор содержит версию mgfp5 зеленого флуоресцентного белка Aequoria victoria в трансляционном слиянии с gusA .

      Данные последовательности Genbank

      Концентрация антибиотиков для селекции.
      В бактериальной системе:
      Устойчивость к канамицину ( aphIII / nptIII / 3’5 ’’ — аминогликозид фосфотрансфераза типа III из Enterococcus faecalis pJh2) у бактерий: используйте 50 мкг / мл в E.coli и A.tumefaciens .

      В заводской системе:

      Ген устойчивости л.с. / час (от видов Klebsiella , через E.coli )
      Селективный антибиотик трансформированных растений Гигромицин B
      Концентрация в Arabidopsis 50 мкг / мл в среде для проращивания
      Концентрация в рисе 50 мкг / мл в 2N6, затем в RGH6
      Концентрация в табаке 50 мкг / мл в RMOP, затем в MST

    Недвижимость

    • Форма

      Лиофилизированный

    • Инструкции по хранению

      Поставляется при 4 ° C.Хранить при -20 ° C.

    • Загрузка информации о концентрации …

    Изображения

    • Вектор экспрессии растений pCambia1304 (ab275550)

    Листы данных и документы

    • SDS скачать

      Страна / регион Выберите страну / регион

      Язык Выбор языка

    • Скачать брошюру

    Список литературы (0)

    ab275550 еще не упоминался в каких-либо публикациях.

    Отзывы клиентов и вопросы и ответы

    Вектор экспрессии растений pCambia1300 (ab275754)

    Обзор

    • Название продукта

      Вектор экспрессии растений pCambia1300

    • Общие примечания

      Вектор содержит ген устойчивости к канамицину для бактериальной селекции, ген устойчивости к гигромицину B для селекции растений и не содержит репортерного гена, что позволяет создать собственную систему пользователя.

      Вектор pCambia1300 предлагает:
      Высокое число копий в E.coli для высоких выходов ДНК
      репликон pVS1 для высокой стабильности в Agrobacterium
      Малый размер
      Сайты рестрикции, разработанные для модульных модификаций плазмид, и небольшие, но адекватные полилинкеры для введения интересующая вас ДНК
      Селекция бактерий с канамицином
      Селекция растений с гигромицином B

      Селекционные гены растений в векторах pCambia управляются двойной энхансерной версией промотора CaMV 35 S и заканчиваются сигналом polyA CaMV 35 S.

      Этот вектор содержит минимальные гетерологичные последовательности для трансформации растений и отбора трансформантов, позволяющие вставлять желаемые гены для трансформации в растения, но требующие всех промоторных и терминаторных последовательностей для экспрессии в растении вновь клонированных генов.

      Полилинкер pUC18 во фрагменте lacZ a позволяет отсеивать синий / белый клоны при клонировании E. coli .

      Данные последовательности Genbank

      Концентрация антибиотиков для селекции.
      В бактериальной системе:
      Устойчивость к канамицину ( aphIII / nptIII / 3’5 » — аминогликозид фосфотрансфераза типа III из
      Enterococcus faecalis pJh2) у бактерий: используйте 50 0003 мкг / мл E.coli в мкг / мл в мкг / мл E.coli в бактериях. A.tumefaciens .

      В заводской системе:

      Ген устойчивости л.с. / час (от видов Klebsiella , через E.coli )
      Селективный антибиотик трансформированных растений Гигромицин B
      Концентрация в Arabidopsis 50 мкг / мл в среде для проращивания
      Концентрация в рисе 50 мкг / мл в 2N6, затем в RGH6
      Концентрация в табаке 50 мкг / мл в RMOP, затем в MST

    Недвижимость

    • Форма

      Лиофилизированный

    • Инструкции по хранению

      Поставляется при 4 ° C.Хранить при -20 ° C.

    • Загрузка информации о концентрации …

    Изображения

    • Вектор экспрессии растений pCambia1300 (ab275754)

    Листы данных и документы

    • SDS скачать

      Страна / регион Выберите страну / регион

      Язык Выбор языка

    • Скачать брошюру

    Список литературы (1)

    ab275754 упоминается в 1 публикации.

    • Maqbool A et al. Структурная основа распознавания патогенов интегрированным доменом HMA в иммунном рецепторе NLR растения. Элиф 4: Н / Д (2015). PubMed: 26304198

    Отзывы клиентов и вопросы и ответы

    Серия мини-бинарных векторов для трансформации растений

  • An, G., Watson, B., Stachel, S., Gordon, M.P. и Нестер, Э.W. 1985. Новые средства клонирования для трансформации высших растений. EMBO J. 4: 277–284.

    Google Scholar

  • An, G. 1986. Разработка векторов экспрессии промоторов растений и их использование для анализа различной активности промотора нопалинсинтазы в трансформированной ткани табака. Физиология растений 81: 86–91.

    Google Scholar

  • Бехтольд, Н., Эллис, Дж. И Пеллетье, Г.1993. In planta перенос гена, опосредованный Agrobacterium , путем инфильтрации взрослых растений Arabidopsis thaliana . C.R. Acad. Sci. Париж, Life Sci. 316: 1194–1199.

    Google Scholar

  • Беккер Д., Кемпер Э., Шелл Дж. И Мастерсон Р. 1992. Новые бинарные векторы растений с селектируемыми маркерами, расположенными проксимальнее левого края Т-ДНК. Завод Мол. Биол. 20: 1195–1197.

    PubMed Google Scholar

  • Бент, А.Ф. и Клаф, С.Дж. 1998. Трансформация зародышевой линии Agrobacterium : трансформация Arabidopsis без культуры ткани. В: С. Гелвин и Р.А. Schilperoort (Eds.), Руководство по молекулярной биологии растений, 2-е изд. Kluwer Academic Publishers, Дордрехт, Нидерланды, стр. B7: 1–14.

    Google Scholar

  • Bevan, M. 1984. Бинарный вектор Agrobacterium для трансформации растений. Nucl. Acids Res. 12: 8711–8721.

    PubMed Google Scholar

  • Бутри М., Надь Ф., Поульсен К., Аояги К. и Чуа Н.-Х. 1987. Нацеливание бактериальной хлорамфениколацетилтрансферазы на митохондрии трансгенных растений. Природа 328: 340–342.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • Кангелози Г.А., Бест Е.А., Мартинетти Г. и Нестер Е.В. 1991. Генетический анализ Agrobacterium .Meth. Энзимол. 204: 384–397.

    PubMed Google Scholar

  • Christensen, A.J. and Quail, P.H. 1996. Векторы на основе промотора убиквитина для высокого уровня экспрессии селектируемых и / или скрининговых маркерных генов в однодольных растениях. Трансген. Res. 5: 213–218.

    Google Scholar

  • Фриш, Д.А., Харрис-Халлер, Л.В., Йокубайтис, Н.Т., Томас, Т.Л., Хардин, С.Х. и Холл Т. 1995. Полная последовательность бинарного вектора Bin 19. Plant Mol. Биол. 27: 405–409.

    PubMed Google Scholar

  • Глив, А.П. 1992. Универсальная бинарная векторная система с организационной структурой TDNA, способствующей эффективной интеграции клонированной ДНК в геном растения. PlantMol. Биол. 20: 1203–1207.

    Google Scholar

  • Guerineau, F., Woolston, S., Brooks, L. и Mullineaux, P. 1988. Кассета экспрессии для нацеливания чужеродных белков в хлоропласты. Nucl. Acids Res. 16: 11380–11388.

    PubMed Google Scholar

  • Хайдукевич П., Сваб П.З. и Maliga, P. 1994. Семейство pBZP бинарных векторов Agrobacterium . Завод Мол. Биол. 25: 989–994.

    PubMed Google Scholar

  • Haseloff, J., Siemering, K.R., Prasher, D.C. и Hodge, S. 1997. Удаление загадочного интрона и субклеточная локализация зеленого флуоресцентного белка необходимы для яркой маркировки трансгенных растений Arabidopsis . Proc. Natl. Акад. Sci USA 94: 2122–2127.

    PubMed Google Scholar

  • Hoekema, A., Hirsch, P.R., Hooykaas, P.J.J. и Schilperoort, R.A. 1983. Стратегия бинарного растительного вектора, основанная на разделении vir — и Т-областей плазмиды Agrobacterium tumefaciens Ti.Nature 303: 179–180.

    Google Scholar

  • Holsters, M., deWaele, D., Depecker, A.D., Messens, E., VanMontagu, M. и Schell, J. 1987. Трансфекция и трансформация A. tumefaciens . Мол. Genet Genet. 163: 181–187.

    Google Scholar

  • Kempin, S.A., Liljegren, S.J., Block L.M., Rounsley, S.D., Yanofsky, M.F. и Лам, Э. 1997. Целевое нарушение Arabidopsis .Природа 389: 802–803.

    PubMed Google Scholar

  • Klee, H.J., Yanofsky, M.F. и Нестер, E.W. 1985. Векторы для трансформации высших растений. Био / технологии 3: 637–642.

    Артикул Google Scholar

  • Ма, Х., Янофски, М.Ф., Клее, Х.Дж., Боуман, Дж.Л. и Мейеровиц, Э.М. 1992. Векторы для трансформации растений и космидные библиотеки. Gene 117: 161–167.

    PubMed Google Scholar

  • Miao, Z.-H. и Lam, E. 1995. Направленное нарушение локуса TGA3 в Arabidopsis thaliana . Плант Дж. 7: 359–365.

    PubMed Google Scholar

  • Sambrook, J., Fritsch, E.F. и Maniatis, T. 1989. Молекулярное клонирование: лабораторное руководство, 2-е изд., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (1989).

    Google Scholar

  • Schardl, C.L., Byrd, A.D., Benzion, G., Altschuler, M.A., Hildebrand, D.F. и Хант, А.Г. 1987. Разработка и создание универсальной системы для экспрессии чужеродных генов в растениях. Ген 61: 1–11.

    PubMed Google Scholar

  • Simoens, C., Alliotte, T., Mendel, R., Müller, A., Schiemann, J., Van Lijsebettens, M., Schell, J., Ван Монтегю, М. и Инзе, Д. 1986. Бинарный вектор для переноса геномных библиотек на растения. Nucl. Acids Res. 14: 8073–8090.

    PubMed Google Scholar

  • Wang, K., Herrera-Estrella, L., Van Montagu, M. и Zambryski, P. 1984. Правый конец последовательности 25 п.н. нопалиновой Т-ДНК важен для и определяет направление переноса ДНК от Agrobacterium в геном растений. Ячейка 38: 455–462.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • Сян, К., Miao, Z. и Lam, E. 1997. ДНК-связывающие свойства, геномная организация и паттерн экспрессии TGA6, нового члена семейства TGA факторов транскрипции bZIP в Arabidopsis thaliana . Завод Мол. Биол. 34: 403–415.

    PubMed Google Scholar

  • Переносчики вирусов в сельскохозяйственных культурах

    Эта статья представляет собой краткий обзор переносчиков вирусов на сельскохозяйственные культуры, выращиваемые в нашем регионе центрального побережья.Как видно из нескольких текущих проблем с болезнями (вирус Apium Y в сельдерее, вирус некротических пятен Impatiens в салате, вирус пятнистого увядания томатов в салате / перце / помидоре), вирусы могут быть важными и вредными патогенами.

    Биология и эпидемиология патогенов вирусов растений являются сложными, поскольку обычно такие системы включают восприимчивое растение-хозяин, вирулентный или инфекционный вирусный агент и вектор-организм, который несет и передает вирус. «Вектор» можно определить как организм, который может приобретать и впоследствии передавать патоген (в основном вирусы, но также грибки и бактерии) растениям.

    В общем, вирусов не существует и они выживают в природе без другого организма. Растение-хозяин — основное убежище вирусов. Попав внутрь растения-хозяина, вирусы обычно не могут распространяться на другие растения без помощи внешних факторов (исключение составляют те вирусы, которые могут передаваться пыльцой, переноситься семенами или передаваться, когда корни зараженного растения соприкасаются и пересаживаются с корнями. из здорового растения). Одним из таких внешних факторов является коммерческое размножение растений.При коммерческом размножении растений черенками или делениями кроны (например, артишоками) вирусы, присутствующие в материнском поголовье, также будут присутствовать в материале для размножения.

    Другой важный внешний фактор, распространяющий вирусы, — это переносчик. Переносчики питаются инфицированным растением, заражаются или заражаются вирусом, затем перемещаются на здоровые растения и заражают их путем кормления. Членистоногие (насекомые и клещи) являются наиболее распространенными переносчиками вирусов растений, хотя нематоды и примитивные почвенные микроорганизмы также могут передавать эти патогены.

    Насекомые Hemiptera : Отряд насекомых Hemiptera содержит наиболее важные вирусные переносчики и включает тлей, цикадок, белокрылок и мучнистых червецов. Таксономически эти насекомые раньше относились к отряду Homoptera, но теперь переведены в подотряд Hemiptera.

    Из этих переносчиков тля переносит наибольшее количество вирусов, поражающих растения; Что касается овощей, выращиваемых в прибрежной Калифорнии, цикадка — единственное другое полукрылое животное, которое переносит вирусы, распространяя вирус курчавости верхушки свеклы.Обратите внимание, что цикадки также являются переносчиками бактериальных патогенов, таких как желтая астра и бактерии болезни Пирса.

    Трипсы: Насекомые трипсы не только сами по себе являются важными вредителями растений, но и являются переносчиками вирусов. Во всем мире может существовать около дюжины вирусов (называемых тоспорвирусами), переносимых лишь несколькими видами трипсов. В нашем регионе вирус некротической пятнистости Impatiens и вирус пятнистого увядания томатов являются повреждающими патогенами, поражающими многие овощные и декоративные культуры.

    Хотя вирус желтой пятнистости Tospovirus Iris еще не зарегистрирован в прибрежных районах Калифорнии, он вызывает опасения для лука и связанных с ним культур.

    Нематоды: Нематоды, переносимые через почву, из семейства Longidoridae (роды Trichodorus, Paratrichodorus, Longidorus, Paralongidorus и Xiphinema) передают вирусы. Примечательно, что такие вирусы развили эти сложные взаимоотношения исключительно с носителями нематод и не переносятся тлями или другими организмами. В Калифорнии, например, нематоды Trichodorus и Paratrichodorus переносят вирус погремушки табака на шпинат.Для винограда: Xiphinema americanum, векторов вируса кольцевой пятнистости томата и векторов индекса X.

    Почвенные микробы: Почвенные микроорганизмы, такие как Olpidium и Polymyxa, являются свободноживущими почвенными обитателями, которые также могут инфицировать корни растений и колонизировать их. Некоторые изоляты этих организмов переносят и переносят вирусы растений. Olpidium brassicae — примитивный гриб (называемый хитридом), который является переносчиком вируса салата Мирафиори, возбудителя болезни больших вен салата. Polymyxa betae — примитивный организм (называемый протистом плазмодиофоридов), который тесно связан с патогеном, вызывающим болезнь кайлы крестоцветных; P. betae переносит вирус некротической желтой жилки свеклы на шпинат и сахарную свеклу.

    Управление вирусными болезнями основывается на типичных комплексных стратегиях борьбы с вредителями, которые включают следующее: устойчивые сорта растений, если таковые имеются; семена растений или другие материалы для размножения, не содержащие вирусов; удаление и борьба с резервуарными хозяевами, такими как зимующие сорняки и растения-добровольцы; вспахивать и уничтожать старые собранные посевы; избегать посадки восприимчивых культур на территориях, в которых в прошлом постоянно возникали проблемы с вирусами; практикуйте севооборот так, чтобы одна и та же культура не появлялась постоянно; управлять вектором вируса.

    Борьба с насекомыми-переносчиками с помощью инсектицидов и других мер является важным фактором при борьбе с вирусными заболеваниями. Однако исследователи ясно показали, что, хотя борьба с переносчиками инфекции является подходящим шагом, борьба с насекомыми не обязательно предотвратит заражение. Насекомым требуется всего несколько минут, чтобы питаться растениями и передавать вирус; поэтому распыление и другие операции не работают достаточно быстро, чтобы предотвратить эту передачу. Прямая борьба с почвенными нематодами и микробами-переносчиками также имеет ограниченную эффективность.Фумиганты, вносимые в почву, могут уменьшить, но не полностью уничтожить популяции почвенных организмов-переносчиков.

    Что такое трансмиссивные болезни растений?

    Доктор Томас Т. Ямасита

    Многие патогенные заболевания — болезни, вызываемые вирусами, бактериями, спорами или другими организмами — инициируются «пассивной передачей». То есть инфекционная единица попадает к хозяину с помощью ветра, воды и других пассивных средств.

    Однако многие распространенные заболевания активно переносятся через агентов, которые называются «переносчиками». Формальное определение вектора — «организм или агент, передающий патоген».

    (Источник изображения: Pixabay, используется по лицензии Pixabay.)

    Механические векторы переносят болезнетворные организмы, но не способствуют их развитию.

    Если вектор служит просто пассивным транспортным агентом, а развитие патогена на агенте не происходит, этот вектор называется «механическим вектором».Например, болезнь голландского вяза, часто смертельная грибковая болезнь вязов. Гриб механически передается жуком-короедом вяза (в основном Hylurgopinus rufipes , но другие виды подпадают под общее название).

    Биологические векторы не только переносят такие организмы, но и служат хозяевами во время репродуктивных фаз.

    Агент, в котором или на котором происходит развитие патогена, представляет собой «биологический вектор». Классическим примером биологического вектора является комаров рода Anopheles , в частности Anopheles gambiae . Anopheles часто служит хозяином для простейшего патогена Plasmodium falciparum .

    P. falciparum размножается и развивается в слюнных железах комара и передается хозяевам, когда комар питается. P. falciparum и четыре близкородственных вида простейших паразитов, передаваемых Anopheles , вызывают малярию. Ежегодно этим заболеванием инфицируется более 200 миллионов человек, из которых ежегодно умирает более 700 000 человек.

    Некоторые переносчики, известные как паратенические хозяева, являются просто пассивными переносчиками своего невидимого инфекционного груза.

    Иногда агент располагается в пространстве и времени, чтобы просто облегчить транспортировку или передачу патогена. Например, насекомоядные грызуны могут заразиться паразитом-нематодой, который позиционирует себя для целевого конечного хозяина: кошек, которые ловят и поедают грызунов-носителей паразитов. Эта форма экологически активного агента называется «паратеническим хозяином».Акт пассивного переноса и передачи паратеническим хозяином называется «форезом».

    Например, рассмотрим болезнь увядания сосны, серьезное заболевание, поражающее черные и красные сосны. Возбудителем увядания сосны является нематода Bursaphelenchus xylophilus , которая прячется под кожухами крыла соснового лесоруба японского, Monochamus alternatus . Когда жук начинает питаться новой сосной-хозяином, нематода покидает жука и попадает в раны, образовавшиеся при кормлении жука.Жук — паратенический хозяин, а нематода, B. xylophilus , переносится форезно к ничего не подозревающей сосне.

    Чтобы понять передачу векторных болезней растений, важно критически изучить личности и роли их переносчиков.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *