Фото поли: кадры из фильма — КиноПоиск

Чтобы ваша фотография была принята, обязательно соблюдайте следующие правила:

• Сделайте снимок, на котором вы будете выглядеть как обычно.Удалите все, что закрывает обзор вашего лица.
• Посмотрите прямо в камеру.
• Фотография должна быть цветной, без фильтров.
• На фотографии больше никого не должно быть.Никаких фотобомб, домашних животных или групповых селфи!

Сделайте горизонтальный снимок себя с помощью мобильного телефона или веб-камеры компьютера. В фотография должна включать вашу голову, шею и верхнюю часть плеч.

Если вы находитесь в кампусе, не стесняйтесь зайти на станцию ​​Selfie в оздоровительном центре. , чтобы сделать снимок на фиолетовом фоне.

Войдите в свою учетную запись Student Link и загрузите свою фотографию.

Зайдите в сервисный центр вспомогательного предприятия в оздоровительном центре, чтобы забрать вам новое удостоверение личности. Убедитесь, что вы привели правительство выданное удостоверение личности с фотографией (например, водительские права или паспорт).

Tati Poly Photography — Фотография — Бруклин, Нью-Йорк

Здравствуйте и добро пожаловать! Меня зовут Татьяна, я девочка из Бруклина, но я родилась в Сибири, Россия. С подросткового возраста меня фотографировали повседневные моменты и небольшие события в моей жизни.И я никогда не знал, что фотографировать и создавать воспоминания для других людей станет работой моей мечты! Я путешественник, авантюрист и, конечно же, свадебный и свадебный фотограф! И позвольте мне сказать вам, что я очень люблю свадьбы! Для меня огромная честь засвидетельствовать и задокументировать эту любовь. Я всегда плакал на церемониях.

Несмотря на то, что свадьбы могут быть стрессовыми и беспокойными, я всегда буду рядом с вами и скажу: «Не беспокойтесь! Мы сделаем все возможное из этого дня, и ваши снимки будут потрясающими!» Приняв на работу меня, вы сделаете день свадьбы незабываемым и веселым.
Мое главное видение в свадебной фотографии — не позирование (возможно, только для семейных и портретных снимков), а в остальное время я буду просто снимать ваши интимные моменты, откровенные снимки, заставлять вас много смеяться и делать какие-то глупости и вы можете подумать: «Почему она просит меня об этом?» но поверьте, вам понравится результат. Потому что помните, что к концу дня все дело в вас, ваших моментах, ваших чувствах, ваших эмоциях, вашей истории, и мое основное внимание уделяется красоте и чистым эмоциям в каждом моменте.
Я вкладываю в свою работу всю душу и верю, что это видно на моих фотографиях.

Предлагаемые услуги.
В каждый пакет входит предсвадебная консультация, не менее 6 часов освещения свадебного дня, цифровые изображения с высоким разрешением, полностью отредактированные в цифровой онлайн-галерее в фирменном стиле Tati Poly. В дополнение к бронированию свадебной фотографии пара также может заказать сеанс помолвки, будуарную съемку и сессию помолвки. Второй стрелок также доступен за дополнительную плату.Отпечатки и альбомы разных форм и размеров доступны по запросу. Все пакеты могут быть настроены в соответствии с вашими уникальными потребностями. Итак, давайте подключимся!

Производство фото-сшиваемого поли (триметиленкарбоната) / Polyca

Введение

Травмы сухожилий — частое заболевание в нашей повседневной жизни. Было подсчитано, что более 25% взрослых страдают связанными с сухожилиями проблемами опорно-двигательного аппарата. ¹ При тяжелых повреждениях сухожилий их естественные процессы заживления медленные и недостаточные из-за низкой иннервации, гиповаскулярности и гипоцеллюлярности этих тканей. ^2,3 Хирургическое вмешательство является основной стратегией реконструкции, включая аутотрансплантаты, аллотрансплантаты и ксенотрансплантаты. ^4,5 Однако клинические результаты восстановления сухожилия остаются неудовлетворительными из-за ограниченного количества донорских источников трансплантата, наличия иммунного отторжения и воспаления. ⁶

Тканевая инженерия, также известная как «регенеративная медицина», — это междисциплинарная область, которая объединяет науки о жизни, материаловедение и инженерию в целях разработки биологических заменителей, которые восстанавливают, поддерживают или заменяют больные ткани. ⁷ Тканевая инженерия на основе каркасов, которая представляет собой использование комбинации клеток, каркасов и факторов роста для разработки функциональных заменителей традиционных трансплантатов, демонстрирует большой потенциал для применения в клиническом лечении травм сухожилий. ^6,8,9 В настоящее время технологии изготовления каркасов тканевой инженерии в основном включают 3D-печать, ¹⁰ вязальную машину, ¹¹ и электроспиннинг. ¹² Электроспиннинг — это универсальный и простой подход для создания нановолоконных каркасов, имитирующих структуру нативного внеклеточного матрикса. ^13,14 Таким образом, электроспиннинг широко используется для изготовления каркасов тканевой инженерии.

Как улучшить механические свойства электроспрядных каркасов — один из важнейших аспектов тканевой инженерии. ^1,6,15,16 В общем, существует три метода улучшения механических свойств электропряденых каркасов, включая конструкцию специальной конструкции для каркасов, композитных каркасов с другими материалами и фото-сшивание. Процесс построения конкретной конструкции сложен. ¹⁷ В то время как механические свойства полимерных каркасов просто и широко распространено, физически смешивая их с другими материалами для образования композитных каркасов и с помощью фото-сшивки. ¹⁸ Формирование полимерной сетки из химически сшитых полимеров полезно для улучшения сопротивления ползучести каркасов. ¹⁹ Например, Чен и др. Использовали фото-сшиваемый полимер, соакрилат полимолочной кислоты, для изготовления волокнистого каркаса, ориентированного на электропрядение. Результаты испытаний на циклическое растяжение показали, что фото-сшитый каркас имеет хорошее сопротивление ползучести. ²⁰

Поликапролактон (PCL) — это алифатический линейный полиэфир, одобренный FDA для клинического применения из-за его биосовместимости, биоабсорбируемости и низкой стоимости. ²¹ Однако PCL демонстрирует низкую скорость разложения из-за его полукристаллической и гидрофобной природы, что приводит к относительно медленному процессу заживления поврежденных сухожилий. ^22–24 Кроме того, плохая механическая переносимость PCL является еще одним недостатком для его дальнейшего применения в клинической практике. ²⁵

Поли (триметиленкарбонат) (PTMC), еще один материал, одобренный FDA, представляет собой резиноподобный полимер с температурой стеклования (Tg) около -20 ° C. ^19,21 PTMC обладает уникальными характеристиками разложения, такими как ферментативная деградация с процессом поверхностной эрозии, без образования кислотных продуктов и устойчивость к неферментативному гидролизу. ^26,27 Таким образом, этот эластомерный полимер был использован в регенеративной медицине, включая инженерию сосудистой ткани, ^28,29 восстановление костных дефектов, ^30,31 и имплантацию лекарственной нагрузки. ^32,33 Насколько нам известно, использование PTMC для регенерации сухожилий не исследовалось. Стоит отметить, что ПТМК мягкий при плохой жесткости. ^23,28 Таким образом, изготовление нановолоконных каркасов из ПТМК методом электроспиннинга остается проблемой, поскольку волокна ПТМК будут сжиматься и плавиться. ^33–35

В настоящей работе фото-сшиваемые макромеры PTMC (PTMC-MA) были получены полимеризацией с раскрытием цикла мономеров 1,3-диоксан-2-она (TMC) и затем функционализированы метакрилатом. Нановолоконные каркасы на основе ПТМК получали методом электроспиннинга из смешанных растворов ПКЛ и ПТМК-МА. Наша гипотеза заключалась в том, что введение PCL будет способствовать электроспиннингу PTMC-MA. Кроме того, ожидалось, что использование фото-сшиваемого PTMC-MA вместо PTMC повысит сопротивление ползучести композитных каркасов.Были исследованы свойства композитных каркасов PCL / PTMC-MA, включая морфологию волокон, ориентацию волокон и механические свойства. Чтобы определить клеточную совместимость композитных каркасов PCL / PTMC-MA для их потенциального применения в тканевой инженерии сухожилий, мезенхимальные стволовые клетки мышей культивировали на каркасах, а их пролиферацию и дифференцировку клеток оценивали позже.

Материалы и методы

Материалы

1,3-Диоксан-2-он (триметиленкарбонат, TMC) был получен от Jinan Daigang Biomaterial Co., Ltd. (Цзинань, Китай). Поликапролактон (PCL, Mn≈80 кг / моль), 1,1,1-трис (гидроксиметил) пропан (триметилолпропан, TMP), этилгексаноат олова (II) (Sn (Oct) ₂ ), ангидрид метакриловой кислоты (94%, MMAh), триэтиламин (TEA), аскорбиновая кислота (AA) и дейтерированный хлороформ были приобретены у Sigma-Aldrich (Миссури, США). Гидрид кальция и Irgacure 2959 (2-гидрокси-4- (2-гидроксиэтокси) -2-метилпропиофенон, D2959) были приобретены у Aladdin Inc. (Шанхай, Китай). Дихлорметан (DCM), метанол и диметилформамид (DMF) были получены от Tianjin Zhiyuan Chemical Reagent Factory (Тяньцзинь, Китай).Перед использованием DCM сушили гидридом кальция и перегоняли в атмосфере N ₂ . Гидрохинон был приобретен на Тяньцзиньском заводе химических реагентов Дамао (Тяньцзинь, Китай). Модифицированная по Дульбекко среда Игла с высоким содержанием глюкозы (DMEM) и фетальная бычья сыворотка (FBS) были поставлены от Biological Industries (Израиль), трипсин и раствор пенициллин-стрептомицин-гентамицин были приобретены у Solarbio Inc. (Пекин, Китай). Реагент для определения жизнеспособности клеток PrestoBlue ™ HS был приобретен в Thermo Fisher Scientific (Массачусетс, США).Набор ELISA для мышиного коллагена типа I был приобретен у Qchen Bio Co., Ltd. (Шанхай, Китай). Все остальные реагенты и органические растворители являются аналитическими реагентами (AR) без дополнительной обработки перед использованием.

Синтез метакрилированного поли (триметиленкарбоната)

Трехлепестковая PTMC была получена полимеризацией с раскрытием цикла (ROP) TMC, инициированной TMP, как описано ранее. ³⁶ Молекулярную массу PTMC контролировали путем варьирования количества TMP. Вкратце, TMC / TMP в молярном соотношении 500/1 загружали в колбу в форме сухого баклажана в сухой атмосфере N ₂ .Полимеризацию проводили при 130 ° C в течение 3 дней с использованием 0,13 мас.% Sn (Oct) ₂ в качестве катализатора. Полученный полимер очищали растворением в сухом DCM с последующим осаждением в холодном метаноле 3 раза. Осадок сушили при комнатной температуре в вакууме. Чтобы получить фото-сшиваемое соединение, PTMC-MA был впоследствии синтезирован с использованием установленного протокола с небольшими модификациями. ³⁷ Трехлепестковый PTMC функционализировали в DCM (5 мл / г, PTMC) реакцией с MAAh (4 моль / моль) в присутствии TEA (4 моль / моль) и гидрохинона (0.03 моль / моль). Функционализированную реакцию проводили при комнатной температуре в течение 5 дней, избегая света. Прореагировавший раствор PTMC-MA экстрагировали деминерализованной водой 3 раза, и органическую фазу осаждали холодным метанолом. Осадок сначала сушили в темноте при обычных условиях в течение ночи, а затем сушили в вакууме при комнатной температуре до тех пор, пока его вес не оставался постоянным.

Как PTMC, так и PTMC-MA были охарактеризованы с помощью спектроскопии ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (Mercury-plus 300, Varian, США) и гель-проникающей хроматографии (GPC, Waters Breeze, Waters, США; элюент: тетрагидрофуран; скорость потока: 1.0 мл в минуту; калибровка колонки: стандарты полистирола). Степень функционализации PTMC-MA определяли с помощью ЯМР ¹ H, и в качестве растворителя использовали дейтерированный хлороформ. Среднечисленный молекулярный вес и молярно-массовая дисперсность были измерены с помощью GPC.

Изготовление фото-сшитых каркасов с согласованной ориентацией

(10%, мас. / Об.) Получали растворением PCL и PTMC-MA в DCM / DMF (об. / Об. = 3: 1) с различными весовыми отношениями PTMC-MA к PCL.Полученные смеси перемешивали в течение 12 ч для получения гомогенных растворов перед электроформованием. Для электроспиннинга раствор полимера экструдируют через иглу с тупым концом калибра 20 при скорости потока 5 мл / ч с расстоянием 15 см между фильерой и оправкой. На фильеру подавали напряжение 25 кВ, и выровненные нановолокна собирали с помощью оправки со скоростью 2000 об / мин. Электроформование выполняли в условиях окружающей среды (комнатная влажность H _{комнатная} = 30–50% и комнатная температура T _{комнатная} = 23–28 ° C).

Для получения фото-сшитых нановолокон электроспряденные каркасы погружали в водный раствор D2959 (1 мас.%) На 2 часа с последующим воздействием УФ-источника света (0,072 Вт * см ^-2 ) в течение 10 минут с каждой стороны. После сшивки электроспряденные каркасы осторожно промывали этанолом и PBS. Готовые электроспряденные каркасы сушили в вакууме при комнатной температуре ( T _{комнатная} = 23–28 ° C) в течение 12 часов.

Характеристика фото-сшитых каркасов PCL / PTMC-MA

Морфология каркаса была охарактеризована с помощью сканирующего электронного микроскопа (SEM, Phenom G2 Pro, Phenom-World, Нидерланды) при 5 кВ.Образцы фиксировали на столике с помощью электропроводящей пасты и распыления, покрытого платиной (≈2 нм, 120 с, 20 мА), перед визуализацией на сканирующем электронном микроскопе. Средний диаметр волокна и ориентацию каркаса определяли путем анализа не менее 500 волокон (n ≈ 120, 5 изображений на каркас) из изображений SEM с использованием программного обеспечения ImageJ.

Испытание на монотонное растяжение выполняли для определения механических свойств каркасов до фото сшивания и после сшивания. Вкратце, перед тестированием каждый каркас разрезали на полоски 15 мм × 50 мм с одинаковой толщиной (50 ~ 70 мкм м).Все полоски растягивали со скоростью 20 мм / мин, используя прибор для испытания на растяжение с пневматическим приводом (Instron 5697, США). Более того, для дальнейшего подтверждения влияния обработки фотошивкой на механическое поведение, полосы с 50% содержанием PTMC-MA (PCL / PTMC-MA (1: 1)) были растянуты до 20% деформации в течение 20 циклов, и изменение калибровочной длины записывался каждый цикл. Все испытания проводились в одинаковых внешних условиях ( T _{комната} = 20–30 ° C и H _{комната} = 50–60%, n = 3).

Культура клеток и посев на каркасы

Зеленый флуоресцентный белок (GFP) ⁺ Мезенхимальные стволовые клетки (МСК) мыши C57BL / 6 были получены от Cyagen Biosciences (Гуанчжоу, Китай). МСК размножали в колбе Т-25 и культивировали в среде, состоящей из DMEM с высоким содержанием глюкозы, 10% (об. / Об.) FBS, 1% (об. / Об.) Пенициллин-стрептомицин-нистатин и 0,01% (об. / Об.) ) аскорбиновая кислота. Клетки собирали примерно при 80% слиянии для дальнейшего исследования на основе каркаса.

Фото-сшитые электроспряденые каркасы перфорировали на диски (диаметр = 1 см) и помещали внутрь 48-луночного планшета (n = 3 для каждой группы).Для стерилизации каркасы погружали в 75% этанол на 45 минут 3 раза с последующей промывкой PBS 3 раза по 15 минут каждый для удаления оставшегося этанола. После этого стерильные каркасы погружали в среду для культивирования клеток на ночь перед посевом клеток. После удаления среды с каркасов МСК высевали на каждый каркас плотностью 15000 клеток / лунку в 100 средах для культивирования клеток мкл л. Конструкции клеточного каркаса инкубировали в течение 2 часов, чтобы позволить клеткам прикрепиться, и доливали до 0.5 мл среды для культивирования клеток. Конструкции клетка-каркас культивировали в инкубаторе с влажной атмосферой с 5% CO ₂ при 37 ° C в течение до 21 дня. Среды для культивирования клеток обновляли каждые два дня.

Распределение и жизнеспособность клеток

Распределение МСК на каркасах анализировали с помощью инвертированного флуоресцентного микроскопа (AX10, ZEISS, German). Жизнеспособность клеток, высеянных на каркасы, анализировали с помощью анализа PrestoBlue ^TM в соответствии с протоколом производителя.Вкратце, среду для культивирования клеток заменяли средой, содержащей 10% (об. / Об.) Реагента PrestoBlue ^TM HS, и образцы обертывали алюминиевой фольгой, чтобы избежать света, с последующей инкубацией при 37 ° C в течение 45 минут. Две пустые лунки с добавлением 500 мкл л реагента Presto Blue ^TM HS работали в качестве контроля. Интенсивность флуоресценции измеряли на микропланшет-ридере (Biotek Cytation 5, США; возбуждение 560 нм / эмиссия 590 нм). Жизнеспособность клеток измеряли на 1, 4 и 7 дни.

Иммуноферментный анализ (ELISA)

Концентрация коллагена типа I в среде для культивирования клеток, полученной из МСК, была определена количественно с помощью ELISA.Вкратце, такой же объем среды для культивирования клеток собирали в моменты времени 1, 4, 7, 14 и 21 дня и хранили при -80 ° C перед дальнейшим анализом. Для количественного определения коллагена типа I образцы оценивали с использованием набора Elisa для коллагена типа I в соответствии с протоколом поставщика. Оптическую плотность регистрировали при 450 нм на микропланшет-ридере (Biotek Cytation 5, США).

Статистический анализ

Статистический анализ данных был выполнен с использованием GraphPad PRISM версии 7.00. Был проведен двухфакторный дисперсионный анализ (ANOVA) с последующим апостериорным тестом Тьюки для множественных сравнений, если не указано иное.Результаты были представлены как среднее значение ± стандартное отклонение, а p <0,05 означало статистическую значимость.

Результаты и обсуждение

Синтез PTMC-MA

В данной работе трехплечий PTMC был подготовлен ROP TMC с использованием TMP в качестве инициатора. Затем продукт был функционализирован метакриловым ангидридом с получением фото-сшитого PTMC-MA (рис. 1A). Полученные макромеры ПТМК имели относительно низкую молекулярную массу (Mn = 21,90 кг / моль или M _W = 34.30 кг / моль) и умеренной молярно-массовой дисперсностью (PDI = 1,56), измеренной с помощью GPC (, таблица S1 ). Относительно низкая молекулярная масса будет способствовать повышению механических свойств каркаса после сшивания, поскольку количество метилпропиленовых функциональных групп зависит от количества полимеров. ¹⁹ Путем сравнения спектров ЯМР ¹ H PTMC-MA и PTMC, появление пиков протонов двойной связи при 5,57 м.д. и 6,11 м.д. в PTMC-MA четко подтвердило функционализацию концевых групп PTMC ангидридом метакриловой кислоты ( Рисунок 1B).Степень функционализации определялась аналогичным методом, описанным Geven et al. ³⁶ Можно рассчитать среднюю степень функционализации примерно 75%. Для оценки плотности сшивки сети PTMC-MA содержание геля измеряли в различные моменты времени воздействия УФ-излучения (, таблица S2 ). Результаты показали, что содержание геля PTMC-MA было самым высоким до 99,37% после воздействия УФ в течение 10 мин. Содержание геля немного уменьшилось по мере увеличения времени воздействия до 15 минут, что может быть связано с деградацией сети. ³⁸ Таким образом, время УФ-воздействия для композитных каркасов PCL / PTMC-MA было установлено на 10 мин.

Изготовление каркасов из PCL / PTMC-MA с фото-сшивками

Внутри нативного сухожилия веретеновидные теноциты организованы в линейные массивы, выровненные по нано-коллагеновым волокнам и чередующиеся между ними. ² Недавние исследования показали, что существует сильная взаимосвязь между топографией каркаса и поведением клеток. ³⁹ Например, ориентация электропряденых волокон тесно связана с дифференцировкой, удлинением и миграцией семенных клеток. ^24,40 Следовательно, каркас тканевой инженерии должен быть идеально спроектирован так, чтобы имитировать микросреду ECM, что полезно для лечения травм сухожилий. Здесь мы использовали электроспиннинг, универсальный и простой подход, для создания выровненных нановолоконных композитных каркасов.

SEM композитных нановолокон, полученных при различных массовых соотношениях PCL и PTMA-MA, показаны на рисунке 2. Морфология волокон композитных нановолокон сильно зависит от части PTMC-MA. Когда доля PTMC-MA увеличилась с 0% до 50% (чистый PCL, PCL / PTMC-MA (3: 1) и PCL / PTMC-MA (1: 1)), наблюдалась гомогенная и ультратонкая морфология волокна. (Рисунок 2A – C). Когда весовое соотношение достигло 75% (PCL / PTMC-MA (1: 3)), волокна имели расплавленную морфологию с увеличением межсоединений волокон (Рисунок 2D).При изготовлении чистого PTMC-MA волокнистой структуры не наблюдалось из-за его естественного аморфизма и плохой жесткости, приводящей к слиянию волокон, особенно при относительно более низкой молекулярной массе (рис. 2E). ^29,33 Отсутствие существенной разницы в морфологии каркасов до и после погружения в PBS ( Рисунок S1 ), что свидетельствует об успешном сшивании композитных нановолокон PCL / PTMC-MA. На рис. 2F – H показаны средние диаметры волокон и распределение диаметров матов из электропряденого волокна.Подобный средний диаметр волокна (около 600 нм) был обнаружен, несмотря на увеличение содержания PTMC-MA с 0% до 50%. Размер композитных волокон, полученных в настоящей работе, был сопоставим с коллагеновыми волокнами в нативных сухожилиях. ⁴¹ Ориентация волокон была проанализирована статистикой углов волокон на их микрофотографиях SEM (рис. 2I – K). Большинство волокон PCL было ориентировано с распределением углов от -30 ° до 50 °. Волокна PCL / PTMC-MA (3: 1) (от -50 ° до 50 °) имели почти такой же диапазон углов распределения, что и волокна PCL / PTMC-MA (1: 1) (от -40 ° до 50 °).Однако последний имел более равномерное распределение по всем углам, что указывало на более беспорядочно ориентированные волокна. Взятые вместе, увеличение содержания трехлепесткового PTMC-MA принесет в жертву ориентацию волокон композитных волокон.

Механические свойства каркасов PCL / PTMC-MA, сшитых на фото

Идеальный каркас должен соответствовать ряду механических свойств для поддержания основной функции после имплантации в тело. ⁴² Механические свойства композитных каркасов PCL / PTMC-MA до и после сшивания определяли с помощью монотонного теста (рис. 3).Модуль Юнга, деформация текучести и максимальное напряжение при разрыве для каркасов из чистого PCL составляли 11,16 ± 0,55 МПа, 77 ± 10% и 4,96 ± 0,94 МПа, соответственно, и эти значения постепенно увеличивались по мере увеличения содержания трехлепесткового PTMC-MA. 15,26 ± 2,37 МПа, 126 ± 22% и 8,35 ± 1,24 МПа для PCL / PTMC-MA (3: 1) перед сшивкой; 17,00 ± 1,22 МПа, 149 ± 12% и 10,31 ± 1,82 МПа для PCL / PTMC-MA (1: 1) перед сшиванием; 19 ± 3,42 МПа, 159 ± 9% и 13,21 ± 0,47 МПа для PCL / PTMC-MA (1: 3) перед сшивкой.Предыдущее исследование продемонстрировало, что композитные каркасы PCL / PTMC обладают превосходной эластичностью и жесткостью по сравнению с каркасами из чистого PCL благодаря сочетанию преимуществ PCL и PTMC. ²¹ Механические свойства композитных каркасов PCL / PTMC-MA дополнительно улучшаются после УФ-сшивки, которая была обоснована тем, что метилаллилы функционального полиэфира в УФ-области сшиваются друг с другом и образуют полимерную сетку. ¹⁹ Как и ожидалось, композитные каркасы PCL / PTMC-MA (1: 3) с самым высоким содержанием PTMC-MA показали самый высокий модуль Юнга (31.13 ± 1,30 МПа) и максимальное напряжение при разрыве (23,80 ± 3,44 МПа) после фото-сшивки. Однако штамм текучести фото-сшитых каркасов PCL / PTMC-MA (1: 3) (170 ± 22%) был ниже, чем у фото-сшитых PCL / PTMC-MA (1: 1) (190 ± 22%). , что может быть связано с коагуляцией волокон. ³⁴

Чтобы исследовать влияние фото-сшивки на механические свойства композитных каркасов, было проведено монотонное испытание циклов релаксации натяжения для оценки сопротивления ползучести каркасов (рис. 4).Сопротивление ползучести тесно связано со стабильностью каркаса и играет ключевую роль во время регенерации тканей. ⁶ Каждая калибровочная длина образца была записана до и после одного монотонного испытания на релаксацию отрыва (рис. 4A). Непрерывное увеличение калибровочной длины образца для несшитых каркасов наблюдалось во время монотонных испытаний циклов растягивающей релаксации, и каркасы разрывались на одиннадцатом цикле во время растягивания-релаксации несшитых каркасов. Однако калибровочная длина для сшитых каркасов оставалась почти постоянной.Обратите внимание, что модуль Юнга для несшитых каркасов резко возрастает по мере увеличения циклов вытягивающей последовательности, что может быть вызвано увеличением кристалличности PCL во время вытягивания. ⁴³ Напротив, не наблюдалось очевидной разницы в модуле Юнга для сшитых каркасов во время монотонных испытаний циклов релаксации натяжения (рис. 4В), что указывает на более стабильные каркасы после фото-сшивки. Предыдущие исследования показали, что фото-сшитый PTMC-MA показал повышенную стабильность и сопротивление ползучести по сравнению с PTMC. ^19,28

Сообщалось о нескольких исследованиях улучшения механических свойств каркасов PCL. ^44–47 Например, Cheol et al. Ввели человеческий сывороточный альбумин (HSA) в PCL для получения композитных каркасов PCL / HSA. ⁴⁸ Механические свойства PCL / HSA (модуль Юнга 14,39 ± 1,30 МПа; максимальное напряжение при разрыве 22,47 ± 3,32 МПа) были выше, чем у чистых каркасов из PCL (модуль Юнга 8,71 ± 0,51 МПа; максимальное напряжение при разрыве 5,02 ± 0,41 МПа). Роберт и др. Разработали выровненные нановолокна PCL для улучшения механических свойств каркаса PCL с помощью электропрядения (модуль Юнга 9.90 ± 0,87 МПа в выровненной PCL по сравнению с 4,02 ± 0,88 МПа в невыровненной PCL). ⁴⁹ Как смешивание с другими материалами, так и создание специальных структур может улучшить механические свойства каркасов PCL; тем не менее, сопротивление ползучести этих каркасов остается неизменным, что ограничивает их применение в тканевой инженерии сухожилий. Механические свойства наших фото-сшитых каркасов PCL / PTMC-MA (1: 3) демонстрируют превосходные механические свойства по сравнению с предыдущими опубликованными исследованиями и обладают хорошим сопротивлением ползучести (Таблица 1).Взятые вместе, фото-сшитые композитные каркасы PCL / PTMC-MA имеют механические свойства, сравнимые с характеристиками нативной ткани сухожилия (модуль Юнга 20–1200 МПа, максимальное напряжение при разрыве 5–100 МПа). ⁵⁰

Адгезия клеток и жизнеспособность клеток

Помимо адекватных механических свойств, идеальный каркас из сухожилий должен быть биосовместимым после имплантации. ^4,42 На фиг. 5 показаны флуоресцентные микрофотографии МСК GFP ⁺ на композитных каркасах PCL / PTMC-MA с различным содержанием PTMC-MA на 1, 4 и 7 дни после посева клеток. Как правило, количество клеток неуклонно увеличивалось на всех исследуемых каркасах в течение исследуемого периода времени. Таким образом, композитные каркасы PCL / PTMC-MA поддерживают адгезию МСК. Предыдущие исследования показали, что клетки будут расти вдоль выровненных нановолокон. ^39,40 В нашей работе, однако, из-за свойств PTMC, который является мягким и эластичным, трудно получить хорошо ориентированные волокна PCL / PTMC-MA с помощью вращающейся оправки.

Жизнеспособность клеток жизненно важна для роста и пролиферации клеток. ⁵¹ Жизнеспособность клеток МСК на каркасах исследовали с помощью восстанавливающего набора реагентов PrestoBlue ^TM HS (рис. 6). Жизнеспособность клеток резко увеличилась на всех каркасах с 1 по 4 день из-за пролиферации МСК, а впоследствии она стала стабильной в результате слияния клеток.На 4-й день жизнеспособность клеток МСК на всех каркасах с электропрядением была выше, чем жизнеспособность планшетов с культурой ткани (контроль), что указывает на то, что каркасы с электропрядением были биосовместимы и поддерживали пролиферацию МСК. PCL / PTMC-MA (3: 1) имел значительно более высокую жизнеспособность клеток, чем PCL / PTMC-MA (1: 3) как на 4-й, так и на 7-й день, что может объясняться ультратонкой волокнистой морфологией PCL / PTMC-MA (3 : 1) каркасы, ведущие к лучшей пролиферации клеток. Для PCL / PTMC-MA (1: 3) он значительно выше, чем у контрольного планшета на 4-й день.В то время как на 7 день PCL / PTMC-MA (1: 3) ниже, чем в контрольном планшете, из-за слияния клеток.

Количественное определение коллагена

Коллаген I типа является основным компонентом внеклеточного матрикса (ЕСМ) сухожилия, который тесно связан с остеогенной дифференцировкой МСК и важен для заживления повреждений сухожилий. ^2,52 Для исследования клеточной дифференцировки МСК на каркасе количество коллагена I определяли с помощью набора для ELISA Collagen I (фиг. 7). Количество коллагена I на всех субстратах резко увеличилось в течение первой недели и впоследствии стало относительно постоянным. Не наблюдалось существенной разницы в секреции коллагена между композитными каркасами независимо от содержания PTMC-MA. На 14-й и 21-й дни количество коллагена I было значительно выше для композитных каркасов, чем для планшетов с тканевыми культурами (контроль).

Выводы

В настоящем исследовании фото-сшитые композитные каркасы PCL / PTMC-MA были успешно изготовлены методом электроспиннинга.Морфология волокон и механические свойства композитных каркасов PCL / PTMC-MA зависели от содержания PTMC-MA. Благодаря интеграции PTMC и образованию сшитой сети, фото-сшитые композитные каркасы PCL / PTMC-MA показали превосходные механические свойства по сравнению с каркасами из чистого PCL, включая сопротивление ползучести, модуль Юнга и максимальное напряжение при разрыве. Фотосшитые композитные каркасы PCL / PTMC-MA (1: 3), которые имели модуль Юнга 31,13 ± 1,30 МПа и максимальное напряжение при разрыве 23.80 ± 3,44 МПа показали сопоставимые механические свойства с нативным сухожилием (модуль Юнга 20–1200 МПа, максимальное напряжение при разрыве 5–100 МПа). Результаты клеточной оценки продемонстрировали, что композитные каркасы PCL / PTMC-MA были биосовместимы для клеточной адгезии, пролиферации и дифференцировки. Таким образом, композитный каркас PCL / PTMC-MA является перспективным материалом для регенерации тканей сухожилия.

Раскрытие информации

Авторы сообщают об отсутствии конфликта интересов в этой работе.

Список литературы

1. Laranjeira M, Domingues RMA, Costa-Almeida R, Reis RL, Gomes ME. Трехмерная имитация архитектуры нативных тканей и волокон направляет полученные из сухожилий клетки и жировые стволовые клетки в искусственные конструкции сухожилий. Малый . 2017; 13 (31): 1700689. DOI: 10.1002 / smll.201700689

2. Бенджамин М., Кайзер Э., Милц С. Взаимосвязи между структурой и функцией в сухожилиях: обзор. Дж Анат . 2008. 212 (3): 211–228. DOI: 10.1111 / j.1469-7580.2008.00864.x

3.Abbah SA, Spanoudes K, O’Brien T., Pandit A, Zeugolis DI. Оценка носителей стволовых клеток для тканевой инженерии сухожилия на доклинических моделях. Ресурс стволовых клеток . 2014; 5 (2): 1–9. DOI: 10.1186 / scrt426

4. Дервин К.А., Бейкер А.Р., Спрагг Р.К., Ли Д.Р., Яннотти Дж.П. Коммерческие каркасы внеклеточного матрикса для восстановления сухожилий вращательной манжеты — биомеханические, биохимические и клеточные свойства. J Bone Joint Surg Am . 2006. 88A (12): 2665–2672. DOI: 10.2106 / 00004623-200612000-00014

5.Calleja M, Connell DA. Ахиллово сухожилие. Радиол опорно-двигательного аппарата Семина . 2010. 14 (3): 307–322. DOI: 10.1055 / с-0030-1254520

6. Ломас А.Дж., Райан К.Н.М., Сорушанова А. и др. Прошлое, настоящее и будущее лечения сухожилий на основе каркасов. Adv Drug Deliv Rev . 2015; 84: 257–277. DOI: 10.1016 / j.addr.2014.11.022

7. Лангер Р., Vacanti JP. Тканевая инженерия. Наука . 1993. 260 (5110): 920–926. DOI: 10.1126 / science.8493529

8. Лауренсин CT, Амброзио AMA, Borden MD, Cooper JA.Тканевая инженерия: применение в ортопедии. Анну Рев Биомед Рус . 1999; 1 (1): 19–46. DOI: 10.1146 / annurev.bioeng.1.1.19

9. Спектор М. Решения тканевой инженерии и регенеративной медицины на основе биоматериалов для решения проблем опорно-двигательного аппарата. Swiss Med Wkly . 2007; 137 Дополнение 155 (Дополнение 155): 157S – 165S.

10. Xu C, Lee W, Dai G, Hong Y. Высокоэластичный биоразлагаемый гидрогель с одной сеткой для клеточной печати. Интерфейсы приложений ACS . 2018; 10 (12): 9969–9979.DOI: 10.1021 / acsami.8b01294

11. Юнеси М., Ислам А., Кишор В., Андерсон Дж. М., Аккус О. Теногенная индукция человеческих МСК анизотропно выровненными биотекстилями коллагена. Дополнительная информация . 2014. 24 (36): 5762–5770. DOI: 10.1002 / adfm.201400828

12. Cheng S, Jin Y, Wang N и др. Саморегулирующийся полимерный многослойный валик, который может сохранять форму каркасов кровеносных сосудов во время биодеградации. Adv Mater . 2017; 29 (28). DOI: 10.1002 / adma.201700681.

13.Ян Г, Ли Х, Хе И, Ма Дж, Ни Г, Чжоу С. От нано к микро и макро: электроспряденные иерархически структурированные полимерные волокна для биомедицинских применений. Prog Polym Sci . 2018; 81: 80–113. DOI: 10.1016 / j.progpolymsci.2017.12.003

14. Bhardwaj N, Kundu SC. Электропрядение: увлекательная техника изготовления волокон. Biotechnol Adv . 2010. 28 (3): 325–347. DOI: 10.1016 / j.biotechadv.2010.01.004

15. Шейх Ф.А., Макоссей Дж., Канту Т. и др. Исследования визуализации, спектроскопии, механики, выравнивания и биосовместимости электропряденых нановолокон из полиуретана медицинского качества (Carbothane 3575A) и композитных нановолокон, содержащих многослойные углеродные нанотрубки. J Mech Behav Biomed Mater . 2015; 41: 189–198. DOI: 10.1016 / j.jmbbm.2014.10.012

16. Wu G, Deng X, Song J, Chen F. Улучшенные биологические свойства биомиметического апатита, изготовленного из нановолоконного биокомпозита поликапролактон / хитозан для регенерации сухожилий и связок. J Photochem Photobiol B . 2018; 178: 27–32. DOI: 10.1016 / j.jphotobiol.2017.10.011

17. Ту Т, Шен Й, Ван Х и др. Модифицированные биоактивные электропряденые волокна Tendon ECM способствуют теногенной дифференцировке МСК и регенерации сухожилий. Appl Mater Сегодня . 2020; 18: 100495. DOI: 10.1016 / j.apmt.2019.100495

18. Шарма Б., Малик П., Джейн П. Нанокомпозиты, армированные биополимерами: всесторонний обзор. Mater Today Commun . 2018; 16: 353–363. DOI: 10.1016 / j.mtcomm.2018.07.004

19. Zant E, Grijpma DW. Синтетические биоразлагаемые гидрогели с превосходными механическими свойствами и хорошими характеристиками клеточной адгезии, полученные комбинаторным синтезом фото-сшитых сетей. Биомакромолекулы .2016; 17 (5): 1582–1592. DOI: 10.1021 / acs.biomac.5b01721

20. Чен Ф., Хаями Д.В.С., Амсден Б.Г. Каркасы из электропряденого волокна из поли (L-лактид-со-акрилоилкарбоната) с механически стабильной извитой структурой для тканевой инженерии связок. Биомакромолекулы . 2014; 15 (5): 1593–1601. DOI: 10.1021 / bm401813j

21. Фэн Дж, Чжо Р-Х, Чжан Х-З. Создание функциональных алифатических поликарбонатов для биомедицинских приложений. Prog Polym Sci . 2012. 37 (2): 211–236. DOI: 10.1016 / j.progpolymsci.2011.07.008

22. Laycock B., Nikolic M, Colwell JM, et al. Прогнозирование срока службы биоразлагаемых полимеров. Prog Polym Sci . 2017; 71: 144–189. DOI: 10.1016 / j.progpolymsci.2017.02.004

23. Рен Й, Вей З., Ленг Х, Ву Т., Биан Й, Ли Й. Взаимосвязь между архитектурой и свойствами сильно разветвленных полимеров: случаи аморфного поли (триметиленкарбоната) и кристаллического поли (эпсилон-капролактона). Дж Phys Chem B . 2016; 120 (17): 4078–4090.DOI: 10.1021 / acs.jpcb.6b01867

24. Нитта К., Кимото А., Ватанабе Дж. Поверхностные свойства амфифильного привитого сополимера, содержащего различные олигосегменты. Полимер . 2016; 96: 45–53. DOI: 10.1016 / j.polymer.2016.04.055

25. Ми Х-И, Цзин Х, Ю Э, Ван Х, Ли Кью, Турнг Л-С. Управление структурой и механическими свойствами гибридных сосудистых каркасов малого диаметра из термопластичного полиуретана / поликапролактона, изготовленных методом электроспиннинга с использованием собранного вращающегося коллектора. J Mech Behav Biomed Mater . 2018; 78: 433–441. DOI: 10.1016 / j.jmbbm.2017.11.046

26. Ян Л., Ли Дж, Ли М., Гу З. Деградация in vitro и in vivo сшитых сеток на основе поли (триметиленкарбоната). Полимеры . 2016; 8 (4): 151. DOI: 10.3390 / polym8040151

27. Ян Л., Ли Дж, Мэн С. и др. Деградация имплантатов поли (триметиленкарбонат-сопсилон-капролактон) in vitro и in vivo. Полимер . 2014. 55 (20): 5111–5124.DOI: 10.1016 / j.polymer.2014.08.027

28. Guo Z, Grijpma DW, Poot AA. Подготовка и характеристика гибких и эластичных пористых трубчатых каркасов PTMC для тканевой инженерии сосудов. Полим Адв Технол . 2017; 28 (10): 1239–1244. DOI: 10.1002 / pat.3954

29. Тао Дж., Гоцюань З., Хуэй Л., Сюнь Дж. Приготовление каркаса из смеси электропряденого поли (эпсилон-капролактон) / поли (триметилен-карбонат) для инженерии сосудистой ткани in situ. Adv Mat Res . 2013; 629: 60–63.

30. Dienel KEG, van Bochove B, Seppala JV. Аддитивное производство биоактивных композитов поли (триметиленкарбонат) / β-трикальцийфосфат для регенерации костей. Биомакромолекулы . 2020; 21 (2): 366–376. DOI: 10.1021 / acs.biomac.9b01272

31. Guillaume O, Geven MA, Sprecher CM, et al. Обогащение поверхности наночастицами гидроксиапатита в изготовленных стереолитографией композитных полимерных каркасах способствует восстановлению костей. Acta Biomater . 2017; 54: 386–398.DOI: 10.1016 / j.actbio.2017.03.006

32. Zhang Y, Liang R-J, Xu -J-J, et al. Эффективная индукция антимикробной активности с помощью системы локальной доставки лекарственного средства, содержащей наночастицы ванкомицина, поли (триметиленкарбонат). Инт Дж. Наномед . 2017; 12: 1201–1214. DOI: 10.2147 / IJN.S127715

33. Zhang X, Geven MA, Wang X, et al. Нанокомпозит, армированный поли (триметиленкарбонатом) / поли (молочной кислотой), с лекарственным покрытием для функциональной доставки остеогенных молекул. Int J Nanomedicine .2018; 13: 5701–5718. DOI: 10.2147 / IJN.S163219

34. Trinca RB, Abraham GA, Felisberti MI. Электропряденые нановолоконные каркасы из сегментированных полиуретанов на основе блоков PEG, PLLA и PTMC: физико-химические свойства и морфология. Mater Sci Eng C-Mater Biol Appl . 2015; 56: 511–517. DOI: 10.1016 / j.msec.2015.07.018

35. Song Y, Yang F, Jansen JA, et al. Пористые трубчатые структуры из поли (триметиленкарбоната), изготовленные методом электропрядения. J Control Release .2008. 132 (3): 79–80. DOI: 10.1016 / j.jconrel.2008.09.071

36. Гевен М.А., Барбьери Д., Юань Х., де Брёйн Д.Д., Грийпма Д.В. Получение и механические свойства фото-сшитых композитов поли (триметиленкарбоната) и наногидроксиапатита. Clin Hemorheol Microcirc . 2015; 60 (1): 3–11. DOI: 10.3233 / CH-151936

37. Хименес-Пардо И., ван дер Вен LGJ, ван Бентем РАТМ, Эстевес АСС, де С Г. Влияние набора кислот и условий полимеризации на структуру поликарбонатов, полученных полимеризацией с раскрытием цикла. J Polym Sci и Polym Chem . 2017; 55 (9): 1502–1511.

38. Сан Дж., Юнг Д., Шоппа Т. и др. Светочувствительные поликарбонат и полиэстер на основе серинола в качестве разлагаемых каркасов. ACS Appl Bio Mater . 2019; 2 (7): 3038–3051. DOI: 10.1021 / acsabm.9b00347

39. Cristofaro F, Gigli M, Bloise N и др. Влияние химии нановолокон и ориентации биоразлагаемых каркасов на основе поли (бутиленсукцината) на дифференцировку остеобластов для регенерации костной ткани. Наноразмер . 2018; 10 (18): 8689–8703. DOI: 10.1039 / C8NR00677F

40. Cardwell RD, Dahlgren LA, Goldstein AS. Диаметр электропряденого волокна, а не выравнивание, влияет на дифференцировку мезенхимальных стволовых клеток в линию сухожилий / связок. J Tissue Eng Regen Med . 2014; 8 (12): 937–945. DOI: 10.1002 / term.1589

41. Mouw JK, Ou G, Weaver VM. Сборка внеклеточного матрикса: многомасштабная деконструкция. Нат Рев Мол Клетка Биол . 2014. 15 (12): 771–785. DOI: 10.1038 / nrm3902

42. Li X, Yin H-M, Su K, et al. Якорь хитозана с помощью полидофамина закрепляется на пористых композитных каркасах для ускорения регенерации кости. ACS Biomater Sci Eng . 2019; 5 (6): 2998–3006. DOI: 10.1021 / acsbiomaterials.9b00209

43. Ван Х, Чжао Х., Turng L-S LQ. Кристаллическая морфология нановолокон электропряденого поли (ε-капролактон) (ПКЛ). Ind Eng Chem Res . 2013. 52 (13): 4939–4949. DOI: 10.1021 / ie302185e

44. Фадаи М., Мирзаи Э., Герамизаде Б., Асвар З.Включение нанофибриллированного хитозана в электропряденые нановолокна PCL позволяет получить каркасы с улучшенными механическими и биологическими свойствами. Углеводный полимер . 2018; 199: 628–640. DOI: 10.1016 / j.carbpol.2018.07.061

45. Экрам Б., Абд Эль-Хади Б.М., Эль-Кади А.М. и др. Повышение стабильности, гидрофильности, механических и биологических свойств электропряденого поликапролактона в системе растворителей муравьиная кислота / уксусная кислота. Волокна Polym . 2019; 20 (4): 715–724. DOI: 10.1007 / s12221-019-8795-1

46.Ван З, Лян Р., Цзян Х и др. Мембраны из нановолокон Electrospun PLGA / PCL / OCP способствуют остеогенной дифференцировке мезенхимальных стволовых клеток (МСК). Mater Sci Eng C-Mater Biol Appl . 2019; 104: 109796. DOI: 10.1016 / j.msec.2019.109796

47. Zhao Q, Wang J, Cui H, Chen H, Wang Y, Du X. Запрограммированные изменяющие форму каркасы, обеспечивающие легкую трехмерную эндотелиализацию. Дополнительная информация . 2018; 28 (29): 1801027. DOI: 10.1002 / adfm.201801027

48. Тивари А.П., Джоши М.К., Парк СН, Ким С.С.Наносетки покрывают композитные нановолокна с повышенной биосовместимостью и механическими свойствами для инженерии костной ткани. Дж. Наноси Нанотехнологии . 2018; 18 (1): 529–537. DOI: 10.1166 / jnn.2018.13930

49. Silva JC, Udangawa RN, Chen JL, et al. Нагруженные картогенином коаксиальные нановолокна, выровненные с помощью PGS / PCL, для инженерии хрящевой ткани. Mater Sci Eng C-Mater Biol Appl . 2020; 107: 110291. DOI: 10.1016 / j.msec.2019.110291

50. LaCroix AS, Duenwald-Kuehl SE, Lakes RS, Vanderby R Jr.Связь между жесткостью сухожилий и отказом: метаанализ. J Appl Physiol . 2013. 115 (1): 43–51. DOI: 10.1152 / japplphysiol.01449.2012

51. Chen Y, Yu B, Xue G, et al. Влияние растворов для хранения на жизнеспособность мезенхимальных стволовых клеток пуповины человека для трансплантации. Трансплантация клеток . 2013. 22 (6): 1075–1086. DOI: 10.3727 / 096368912X657602

52. Клейнман Х.К., Клебе Р.Дж., Мартин Г.Р. Роль коллагеновых матриц в адгезии и росте клеток. Дж. Ячейка Биол . 1981. 88 (3): 473–485. DOI: 10.1083 / jcb.88.3.473

Документы для уроков фотографии Outdoor Poly

По четвергам, примерно в обеденное время, вы можете увидеть, как ученики старших классов носят «пропуска для прессы», бродя по кампусу Дайкер-Хайтс, оставаясь при этом социально дистанцированным, фотографируя возле трибун, вокруг прудов и делая большие снимки учеников, обучающихся в палатках.

Класс работает над совместным фотодокументальным проектом о нашем опыте на открытом воздухе в Поли, который должен стать физической и цифровой фреской и, возможно, книгой.

Адина Шерер ведет уроки фотографии удаленно по четвергам и встречает студентов в палатке 57 на Zoom в 11:30, пока они обедают. Пока они едят, она рассказывает о своих делах на этот день. Студенты, которые используют камеры своих телефонов, учатся понимать, как использовать свет и тень, экспозицию и композицию в своих фотографиях.Scherer учит их, как использовать приложения для редактирования фотографий, такие как ProCam и Snapseed, и как использовать кривые и инструменты кисти. Она также делится с ними учебными пособиями по Snapseed.

В 11:55 Шерер и ученики занимаются тай-чи по пять минут, прежде чем ученики вместе с партнерами отправятся фотографировать в назначенных им местах — все, что связано с обедом; ванные комнаты, палатки и водные станции; трибуны, Башня, детали зданий и общие планы; забор, где вешают стулья, деревья и пейзажи; территория теплицы; пруды, палисадник и палатки МС на расстоянии.13 учеников — двое девятиклассников, шесть десятиклассников и пять двенадцатиклассников — работают в группах, которым поручено посещать разные места в разные дни.

Шерер говорит ученикам смотреть с разных точек зрения, с разных точек зрения и с разных расстояний. Она говорит, что некоторые задания — например, водная станция или забор — «могут показаться не очень захватывающими, но сделают их захватывающими, если проявят творческий подход». Возможно, студенты могут смотреть очень близко или снимать с большого угла.«Всегда находите интересные части света и тени, чтобы поддерживать« алхимию света »в своей работе», — говорит она.

Когда ученики отправляются на выполнение своих заданий, Шерер напоминает им: «Посмотрите на небо! Покажи, что прямо перед нами. Лови момент ».

«Съемка кампуса заставила меня больше внимания уделять масштабу», — сказал Уильям Линг-Риган ’24 . «Съемка как крошечных деталей, так и широких пейзажей с помощью камеры научила меня сосредотачиваться на том, как масштаб влияет на то, как я вижу вещи.Этот урок фотографии помог мне обратить больше внимания на то, что происходит за камерой, а не только перед ней. Г-жа Шерер научила нас, что ракурсы, кадрирование, композиция и редактирование фотографии так же важны, как и фотографируемый объект ».

«Мне очень нравится снимать портреты одноклассников и друзей, а также людей, которых я не знаю, — сказал Линг-Риган. «Хотя не все фотографии получаются удачными, приятно работать с другими людьми и слышать их идеи о том, как мне следует их фотографировать.Он добавил: «Когда г-жа Шерер показала моим родителям некоторые фотографии, сделанные классом, они сказали мне, что могут сразу сказать, какие из них были моими. Хотя все мы фотографируем один и тот же кампус, фотографии каждого человека уникальны и отражают их собственный художественный стиль ».

«Снимки на прошлой неделе были действительно потрясающими, — сказал Шерер посетителю класса. После 25-минутной фотосъемки учащиеся загружают свои фотографии в папку на Google Диске.Шерер оформит фотографии в виде коллажа в стиле Дэвида Хокни и, возможно, в книгу в конце семестра.

«Как только мы перейдем к виртуальному миру, я начну процесс создания коллажей в стиле Хокни с их работами», — сказал Шерер. «Это слишком сложно, чтобы заставить их работать над этим социально дистанцированно или виртуально, поэтому я создам это, и, возможно, книгу уникальных изображений, которые действительно особенные. Гораздо больше впереди ».

Мы с нетерпением ждем возможности увидеть больше сцен Outdoor Poly глазами наших студентов.

Как создавать низкополигональные изображения в Affinity Photo

В этом уроке мы узнаем, как создавать низкополигональные изображения в Affinity Photo. Низкополигональное искусство возникло на заре 3D-анимации и 3D-компьютерной графики. Он был создан для уменьшения времени рендеринга, необходимого для создания 3D-сцен. В технике low poly использовалось минимально возможное количество полигонов для создания этих сцен. Сегодня, помимо видеоигр, иллюстраторы и 3D-художники все еще используют low poly в своих композициях.Этот эффект помогает им создавать глубину и текстуру в своей работе, сохраняя при этом минималистичный вид своих работ.

Перейдите по следующей ссылке, чтобы загрузить изображение для учебника:

Parrot

Сначала перейдите в File> Open и выберите изображение попугая.

На панели слоев щелкните значок Lock на пиксельном слое, чтобы разблокировать изображение.

Затем возьмите инструмент Pen Tool из панели инструментов . Возьмите инструмент Pen Tool и разместите точки вокруг птицы, чтобы выделить птицу. На панели Swatches Panel убедитесь, что цвет заливки (белый цвет) выключен.

После того, как вы выбрали птицу, перейдите на контекстную панель инструментов и нажмите Selection . Затем возьмите инструмент Move Tool . Нажмите CTRL + C , чтобы скопировать выделение.

Теперь перейдите в Файл> Новый . Перейдите к Печать и выберите размер документа A3 . Это должно быть 297 мм на 420 мм (или 11,6 дюйма на 16,5 дюйма). Затем нажмите Создать .

Нажмите CTRL + V , чтобы вставить птичку в новый документ. Щелкните значок Lock , чтобы заблокировать слой с птицей.

Затем перейдите к панели преобразования и включите Lock Aspect Ratio .Затем измените размер птицы.

Возьмите Freehand Selection Tool из панели инструментов . На контекстной панели инструментов установите Type на Polygonal и установите Mode на New . Выберите слой с птицей на панели слоев .

После того, как вы создали первую форму, перейдите в меню Filters . Выберите Blur> Average .Нажмите CTRL + D , чтобы отменить выбор.

Теперь нарисуйте еще одну многоугольную фигуру рядом с первой. Затем нажмите CTRL + ALT + F , чтобы повторно применить фильтр Среднее размытие к новому выделению. Или вы можете перейти в меню Filters и снова щелкнуть Blur> Average .

После того, как вы нарисовали все многоугольные формы на птице, возьмите Flood Fill Tool из панели инструментов .Возьмите инструмент и щелкните документ. Убедитесь, что слой с птицей не выбран. Новый слой пикселей будет создан на панели слоев .

Перетащите новый слой под слой с птицей на панели слоев .

Теперь возьмите инструмент Gradient Tool из панели инструментов . Перетащите инструмент Gradient Tool сверху вниз. Выберите верхнюю границу цвета. Затем перейдите на панель Swatches Panel и дважды щелкните цвет заливки, чтобы вызвать Color Chooser .Установите этот цветовой ограничитель на следующий цвет, чтобы вызвать Color Chooser . Установите этот цветовой стоп на следующий шестнадцатеричный код # 05A59B .

После этого щелкните в середине инструмента градиента, чтобы добавить третью цветовую точку. Установите цвет этого # 9B7403 .